[发明专利]一种乌洛托品分子印迹固相萃取柱的制备方法及应用

权利要求书

1.一种乌洛托品分子印迹固相萃取柱的制备方法，其特征在于，以乌洛托品为模板分子、2-甲基丙烯酸为功能单体、2-甲基-2-丙烯酸-1,2-乙二醇酯为交联剂、2,2'-偶氮二异丁腈为引发剂，通过如下步骤制备：

（1）将模板分子乌洛托品、功能单体2-甲基丙烯酸、交联剂2-甲基-2-丙烯酸-1,2-乙二醇酯，充分溶解于致孔剂中，再加入引发剂2,2'-偶氮二异丁腈，得到混合溶液；其中，模板分子与功能单体的摩尔比为1:6，功能单体与交联剂的摩尔比为1:10，引发剂与功能单体的摩尔比为1:20，致孔剂为比例1:1的甲醇/乙腈；

（2）向混合溶液中充入氮气除氧，密闭后于50℃水浴条件下振荡反应8小时，取出块状聚合物研磨，过100~200目筛，收集聚合物颗粒，采用比例为1:4的乙酸/甲醇混合溶剂对聚合物颗粒抽提18小时，除去多余的模板分子，再用纯甲醇抽提6小时，60℃真空干燥得到乌洛托品分子印迹固相萃取填料；

（3）将100~500mg的乌洛托品分子印迹固相萃取填料，填充于固相萃取空柱内，两端分别装上聚乙烯筛板，该萃取柱的体积为3~6mL。

2.如权利要求1所述的制备方法制备的乌洛托品分子印迹固相萃取柱在食品检测中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

（1）固相萃取柱装填好后，依次用1个柱体积的甲醇和1个柱体积的乙醇活化柱体；

（2）称取食品样品5~10g，加入50mL提取溶剂甲醇、乙醇、乙腈或水中的一种或两种的混合溶剂，振荡混匀，快速定性滤纸过滤，收集滤液用于净化；

（3）取1~2个柱体积的样品提取液上样注入固相萃取柱；

（4）用1个柱体积的乙醚清洗柱体，以除去食品基质中的杂质；

（5）最后用2~3个柱体积的甲醇、乙醇、乙腈、水中的一种或两种的混合溶剂为洗脱溶剂，洗脱乌洛托品，收集洗脱液，采用液相色谱仪或液质联用仪进行测定。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：

（1）向已使用过的乌洛托品分子印迹固相萃取柱中，注入3~5个柱体积的比例为1:4的乙酸/甲醇混合溶剂，清洗柱体内残留的乌洛托品分子与杂质；

（2）用2~3个柱体积的甲醇清洗柱体，以除去残留的乙酸；

（3）按上述处理后的分子印迹固相萃取柱，再次应用于食品中乌洛托品的分离、富集与纯化。