[发明专利]一种稠李叶总黄酮的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种稠李叶总黄酮的制备方法及其应用。

背景技术

自由基是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物。细胞在正常的代谢过程中，或者受到高能辐射，以及高压氧、药物、香烟烟雾和光化学空气污染等作用，都会产生自由基。

研究表明，自由基从产生到衰亡的过程就是电子转移的过程。在生命体系中，电子的转移是一种最基本的运动，而氧的得电子能力很强，因此，生物体内许多化学反应都与氧有关。研究发现损害人体健康的自由基几乎都与那些活性较强的含氧物质有关，与这些物质相结合的自由基叫做活性氧自由基。活性氧自由基对人体的损害实际上是一种氧化过程。因此，要降低自由基的损害，就要从抗氧化做起。

稠李为蔷薇科李属植物，叶片中含有丰富的黄酮类化合物，据现代医学研究证明，黄酮类化合物分子中含有多电子的羟基部分，使其具有良好的抗氧化性能，是一种天然抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基、抗衰老和增加机体免疫力的生理活性作用。

发明内容

本发明的目的在于寻求新型高效的天然抗氧化剂的开发利用，提供了一种稠李叶总黄酮的制备方法及其应用。

本发明是通过如下技术方案完成的，具体内容包括：稠李叶总黄酮的制备方法以及其在制备具有抗氧化作用的药物中的应用。

1.一种稠李叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：

a.原料处理：将稠李叶阴干、粉碎，过40目筛；

b.超声波提取：将原料置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量3~5倍的50~70%的乙醇溶液，设置超声温度为60~70℃，时间为60~90min，过滤，滤渣重复提取1~2次，合并滤液；

c.纯化：将步骤b 中所得的滤液浓缩至无醇味，转入径高比为1:4~6的大孔吸附树脂柱，先用2~3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用4~6倍柱体积的60~80%的乙醇洗脱，收集洗脱液；

d.洗脱液浓缩，干燥，即得稠李叶总黄酮。

步骤c中所述的大孔吸附树脂的类型为AB-8、D-101、XDA-1等。

2.稠李叶总黄酮在制备具有抗氧化作用的药物中的应用

本发明获得的稠李叶总黄酮，通过对其抗脂质过氧化能力、清除超氧阴离子自由基（^-O₂）₂能力和清除DPPH自由基能力等指标的研究表明：稠李叶总黄酮具有很强的抗脂质过氧化能力，同时还可以有效清除超氧阴离子自由基和DPPH自由基。因此，稠李叶总黄酮是开发新型高效的天然抗氧化剂的一个好选择。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将稠李叶阴干、粉碎，过40目筛；将原料置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量3倍的50%的乙醇溶液，设置超声温度为60℃，时间为60min，过滤，滤渣重复提取1次，合并滤液；将所得的滤液浓缩至无醇味，转入径高比为1:4的AB-8大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用4倍柱体积的60%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液浓缩，干燥，即得稠李叶总黄酮，以芦丁为对照品，经UV检测，其含量为71.2%。

实施例2：

将稠李叶阴干、粉碎，过40目筛；将原料置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量4倍的70%的乙醇溶液，设置超声温度为65℃，时间为60min，过滤，滤渣重复提取2次，合并滤液；将所得的滤液浓缩至无醇味，转入径高比为1:6的D-101大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用5倍柱体积的80%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液浓缩，干燥，即得稠李叶总黄酮，以芦丁为对照品，经UV检测，其含量为77.5%。

实施例3：

将稠李叶阴干、粉碎，过40目筛；将原料置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量5倍的60%的乙醇溶液，设置超声温度为70℃，时间为80min，过滤，滤渣重复提取2次，合并滤液；将所得的滤液浓缩至无醇味，转入径高比为1:5的XDA-1大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用6倍柱体积的70%的乙醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液浓缩，干燥，即得稠李叶总黄酮，以芦丁为对照品，经UV检测，其含量为83.4%。

具体药效学研究实验：

将1g上述3个实施例中所得的稠李叶总黄酮，分别用30%的乙醇将其溶解定容在50mL容量瓶中，记为A、B、C，备用。

a.抗脂质过氧化能力的测定