[发明专利]一种脐带间充质干细胞注射液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种脐带间充质干细胞注射液，包括脐带间充质干细胞和混合溶液，其特征在于，所述混合溶液包括：电解质平衡液、羟乙基淀粉、三磷酸腺苷二钠-氯化镁、二甲基亚砜和人血白蛋白。

2.根据权利要求1所述的注射液，其特征在于，所述电解质平衡液为勃脉力A、醋酸钠林格注射液、乳酸钠林格注射液或转化糖电解质注射液中的任意一种或至少两种的混合溶液；

优选地，所述羟乙基淀粉为羟乙基淀粉130/0.4；

优选地，所述三磷酸腺苷二钠-氯化镁为冻干粉剂；

优选地，所述二甲基亚砜为临床级；

优选地，所述人血白蛋白的浓度为10-25％，优选为20％；

优选地，所述脐带间充质干细胞的浓度为5×10⁵-1×10⁶个/mL；

优选地，所述混合溶液包括以下组分：

体积百分含量为25-70％的电解质平衡液；

体积百分含量为5-20％的二甲基亚砜；

体积百分含量为1-50％的人血白蛋白；

按g/mL计的质量体积百分比为1-10％的羟乙基淀粉；和

按g/mL计的质量体积百分比为5-20％的三磷酸腺苷二钠-氯化镁。

3.根据权利要求1或2所述的注射液，其特征在于，所述混合溶液包括以下组分：

体积百分含量为30-60％的电解质平衡液；

体积百分含量为10-20％的二甲基亚砜；

体积百分含量为10-40％的人血白蛋白；

按g/mL计的质量体积百分比为5-10％的羟乙基淀粉；和

按g/mL计的质量体积百分比为10-20％的三磷酸腺苷二钠-氯化镁。

优选地，所述混合溶液包括以下组分：

体积百分含量为34-50％的电解质平衡液；

体积百分含量为10％的二甲基亚砜；

体积百分含量为20-40％的人血白蛋白；

按g/mL计的质量体积百分比为6％的羟乙基淀粉；和

按g/mL计的质量体积百分比为10％的三磷酸腺苷二钠-氯化镁。

4.根据权利要求1-3之一所述的注射液，其特征在于，所述混合溶液包括以下组分：

体积百分含量为44％的电解质平衡液；

体积百分含量为10％的二甲基亚砜；

体积百分含量为30％的人血白蛋白；

按g/mL计的质量体积百分比为6％的羟乙基淀粉；和

按g/mL计的质量体积百分比为10％的三磷酸腺苷二钠-氯化镁。

5.根据权利要求1-4之一所述的注射液，其特征在于，所述脐带间充质干细胞的制备方法包括以下步骤：

(1)将人新鲜脐带清洗后剪切成块；

(2)去除杂质，再次切碎后清洗；

(3)浸泡在消化溶液中消化，所述消化溶液包括胶原蛋白酶、透明质酸酶、中性蛋白酶和D-Hanks液；

(4)过滤、清洗并分装后加入UMSC-CM2培养基并置于CO₂培养箱中进行培养；

(5)细胞贴壁融合后进行消化传代培养2-5代；

(6)洗涤并重悬后备用。

6.根据权利要求5所述的注射液，其特征在于，所述清洗为用D-Hanks液进行清洗；

优选地，所述消化溶液按体积分数包括5-20％的胶原蛋白酶、1-10％的透明质酸酶、1-10％的中性蛋白酶和60-90％的D-Hanks液；

优选地，所述消化溶液按体积分数包括10％的胶原蛋白酶、5％的透明质酸酶、5％的中性蛋白酶和80％的D-Hanks液；

优选地，步骤(4)所述培养为培养至细胞贴壁后更换培养基，每隔2-4天进行换液；

优选地，步骤(5)所述消化为用无血清胰蛋白酶进行。

7.根据权利要求1-4之一所述的脐带间充质干细胞注射液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将电解质平衡液、羟乙基淀粉和人血白蛋白充分混匀，过滤除菌；

(2)加入脐带间充质干细胞；

(3)加入二甲基亚砜；

(4)分装冻存，制备完毕。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述过滤除菌采用除菌级亲水性滤器进行，优选为孔径0.1-1μm的除菌级亲水性滤器，更优选为孔径0.22μm的除菌级亲水性滤器。

9.根据权利要求1-4之一所述的脐带间充质干细胞注射液在制备治疗慢性缺血性心脏病的药物方面的应用。