[发明专利]刺海松中分离的降血脂活性肽及其用途

说明书

技术领域

 本发明涉及的是生物技术领域，具体涉及从刺海松中分离得到的治疗高血脂的活性肽。

背景技术

心血管疾病在我国居于死亡原因的第一或第二位, 其中冠心病的发病与死亡率在某些地区正在上升。已有的证据说明冠心病的发病中有若干危险因素起重要作用, 包括高胆固醇血症、高血压、吸烟和糖尿病。血脂异常（dyslipdemia）一般是指血中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）超过正常范围及(或)高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）低下。低高密度脂蛋白血症也是重要的危险因素。在以上各因素中高胆固醇血症最被重视, 其临床意义已经反复证实, 随血胆固醇的长期增高, 冠心病事件的发生率增加; 长期控制血胆固醇于合适的水平, 可以预防动脉粥样硬化, 而降低血胆固醇可以减轻动脉粥样斑块, 减少冠心病事件。近年来, 对高甘油三酯血症在动脉粥样硬化中的意义的认识正在加深。因此, 在广大人群中进行高脂血症的防治成为动脉粥样硬化防治的重要环节。合理的饮食与生活调节对防治高脂血症极为重要, 大多数人可以经过此法降低血脂。近来新发展的调脂药物已能部分地控制饮食治疗所不能控制的高脂血症。

    申请人通过研究发现，刺海松通过小鼠喂食实验，该藻类具有较好的降低血脂的效果。为了进一步的研究究竟是什么物质起到降脂的作用，申请人通过提取实验发现了一系列的小肽具有较好的降血脂的效果。

发明内容

一方面本发明涉及一类降血脂多肽。其结构具有以下形式：

CHS-03：PSDESPRLVPFAKGSGGRVL         20

CHS-07：CRPGSRILDCQQIVPPA            17

CHS-10：IIHIMMEDGSSGSSIVIVIV          20

CHS-12：QQMFSVRGGSCCDMNNRS        18

CHS-15：MMGSFVIIPPGSSRVMCT          18

CHS-17：GSMRIVVGSMNNSSRSVSPH        20

CHS-20：HAMRIVVMMPHIIISSSRVFS         21

CHS-21：CCACPHMGSRPPHIHHQQCC        20

CHS-23：VVMMHIGSRPVNVPPIIPVAG        21

CHS-24：GGSFVMMTHPACPGSVGSSR        20

CHS-27：INNGSPHIPPGSRVCPCCAAQP        22

另一方面，本发明提供一种分离所述多肽的方法，(1)将刺海松先用PBS缓冲液清洗，然后用13mmol/L HCl溶液匀浆在特定的32摄氏度条件下制备成粗制液；(2)将步骤(1)所得粗制液用7000转/分钟离心20分钟，收集上清液，将上清液用三层纱布过滤，而后加入木瓜蛋白酶（酶活力为800AU/g）1kg，继续保温并不断搅拌进行酶解反应3h，得到酶解液。用葡聚糖G-50(Sephadex G-50)(1.5cm×90cm)分离，18mmol/L HCl溶液洗脱，流速1.3mL/分钟，收集洗脱产物，调节溶液至pH6.8，10000转/分钟离心15分钟，上清液冷冻干燥备用；经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，回收小分子量的条带，经过验证，获得了35个小的多肽，经过试验证实了其中有11个具有较好的生物学活性。

另一方面，本发明提供一种药物组合物，所述的组合物含有如上所述的体多肽。

如上所述的药物组合物，其还含有还包含一种或多种药学上可接受的载体； 优选地，所述药学上可接受的载体选自：水溶性填充剂、pH调节剂、 稳定剂、注射用水和渗透压调节剂；

更优选地，所述水溶性填充剂选自以下的一种或几种：甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、葡萄糖、乳糖和半乳糖；

更优选地，所述pH调节剂为生理可接受的酸、碱和/或盐，优选选自以下的一种或几种：

非挥发性酸如枸橼酸、磷酸、乳酸、酒石酸或盐酸，碱如氢氧化钾、氢氧化钠或氢氧化钾或氢氧化铵，盐如碳酸钠或碳酸钾或碳酸铵盐，碳酸氢钠或碳酸氢钾或碳酸氢铵盐；