[发明专利]一种快速鉴定烟草黑胫病抗性的方法

权利要求书

1.一种快速鉴定烟草黑胫病抗性的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、烟草黑胫病菌培养：

将烟草黑胫病菌0号小种；接种于燕麦培养基上在28℃条件下培养7～10天，待菌丝长满整个皿后，用接种环除去菌皿表面附着的菌丝，留菌皿备用；

步骤二、取待测烟草种子表面消毒：

取待测均匀饱满烟草种子，置于无菌培养皿中，用75%的酒精浸泡3分钟，再用10%的次氯酸钠浸泡5分钟，随后用无菌水反复清洗3次，减少消毒液残留；

步骤三、发芽率，发病率统计，并进行抗病性评价：

分别将步骤二中消毒烟草种子无菌条件下转移到步骤一培养的烟草黑胫病菌皿和没有接种烟草黑胫病菌的燕麦培养基上，保持在相对湿度80%～90%、光照强度1000lx～2000lx、温度25～28℃、3～7天后开始观察种子发芽情况，根据发病率判断供试材料的抗性，发病率≥50%为感病品种，15%≤发病率＜50%为中抗品种，发病率＜15%为抗病品种。

2.所述的一种快速鉴定烟草黑胫病抗性的方法，其特征在于：步骤一中燕麦培养基的制作方法为在1000ml无菌水中加入15～20g燕麦片，煮至燕麦片开花状，定容1000ml，分装到500ml三角瓶中，高压121℃，灭菌20min，无菌条件下分装于无菌培养皿中。

3.所述的一种快速鉴定烟草黑胫病抗性的方法，其特征在于：步骤二中无菌水制作方法为：取1000ml蒸馏水分装到100ml的三角瓶中，高压121℃，灭菌20min。

4.所述的一种快速鉴定烟草黑胫病抗性的方法，其特征在于：步骤三中把已消毒的待测烟草种子播种于烟草黑胫病菌菌皿，每皿100粒。