[发明专利]一种低温双水相冷却提取分离山楂肉原花青素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学提取技术领域，尤其涉及一种低温双水相冷却提取分离山楂肉原花青素的方法。

背景技术

原花青素是自然界一类广泛存在于植物中的天然色素，是一类由不同数量的儿茶素或表儿茶素缩合而成的多酚化合物的总称。原花青素在体内的抗氧化和清除自由基的能力远高于维生素E和维生素C，由于其卓越的抗氧化能力和多种药理活性而日益受到重视，研究表明,原花青素有其强的清除人体内致病的自由基的作用，具有明显抑制糖尿病发病、降低低密度脂蛋白氧化修饰抑制动脉粥样硬化作用，并可降低胆固醇水平，减少血管壁上的胆固醇沉积，提高血管壁弹性，降低血压，预防中风、偏瘫的等功效，在心血管疾病控制中发挥日益重要的作用。此外，花青素可以减缓细胞死亡和细胞膜变性，延缓衰老，对多种癌变如乳腺癌、皮肤癌等都有不同程度的抑制作用。原花青素可以维护皮肤胶原合成，抑制弹性蛋白酶，从而减少皱纹产生；原花青素可抑制络氨酸酶活性，具有防晒美白的作用。享有“皮肤维生素”的美誉。目前，原花色素已作为一类重要的保健食品，天然食品添加剂，代替苯甲酸的等合成食品防腐剂，其开发利用已成为新兴的产业，鉴于此，原花青素的提取分离技术已成为目前研究的热点。

目前报道的花青素的提取办法很多，包括：有机溶剂萃取法、水溶液提取法、超临界流体萃取法、微波提取法、超声波提取法、微生物发酵提取法、加压溶剂萃取等，并结合液相萃取、固相萃取、薄板层析、柱层析、酶法、离子交换法、大孔树脂法、膜分离和综合技术法等进行纯化。其中大孔树脂吸附是近年来花青素提纯最常用的方法之一，而新的纯化方法例如高速逆流色谱应用。但天然花青素因其热敏性，在受热时易于分解失去生理活性，常规热回流提取法和有机溶剂萃取法不仅得率低，而且功能成分受到破坏。加压溶剂萃取、亚临界水提取技术传统的溶剂提取方法提取时间长，生产效率较低，且热溶剂容易造成花青素降解以及生理活性的降低。常温微波提取法、超声波提取法在提取过程中存在升温、并诱发自由基产生，导致花青素分解。因此，采用低温提取技术以解决花青素在提取过程的失活问题是目前研发的重点，超临界CO₂萃取萃取能力强、萃取条件温和、提取率高、产品品质好，是较为理想的花青素提取方法，但必须在25MPa以上的超高压状态下才能进行，限制了设备有效容积的放大，较高的设备制造和运行费用制约了该技术在花青素生产中的应用。为改善低温提取的传质问题，目前已发展出低温微波提取技术、低温超声波提取技术等，但因为提取体系在0℃以下存在结冰的问题，国内外报道的低温提取原花青素的方法是多采用4～8℃，并不是真正意义上的低温。

研究表明，山楂中的原花青素经简单提取即可得到大量具有强生物活性的低聚体原花青素，在许多方面，山楂原花青素比葡萄籽原花青素具有更强的生物活性，而且原料来源广泛，成本低，提取过程不需破壁处理，极具开发价值，但山楂原花青素稳定性较更差，且常规条件还存在着较明显的酶促褐变现象，酶促褐变降低了山楂原花青素的活性，也改变了山楂原花青素的风味的感观。因此，山楂原花青素的低温提取技术更具研发意义。

发明内容

本专利针对上述山楂原花青素提取中的问题，将低温双水相提取分离体系引入山楂原花青素提取，通过实验设计了一种低温双水相冷却提取山楂肉原花青素的方法，该技术使山楂原花青素提取温度降低至-10℃以下，在均质化条件下，实现了真正意义上的高效低温提取，有效保留了山楂原花青素的生理活性，且简化了工艺，原料渣与提取液分离简单效果好、通过双水相分离体系的引入，山楂原花青素与杂质成分得到有效分离，纯度更高。

本发明采用如下技术方案：

本发明的低温双水相冷却提取分离山楂肉原花青素的方法具体步骤如下：

新鲜山渣经清洗后，每10克山渣，加入30-70mL柠檬酸溶液和30-70mL氯化钠溶液，以及30-70mL异丙醇，置于冷冻机中冷却至-18℃，取出，用匀浆机均质处理三次，每次1-3min，静置5-15min，待分相完全后，分去异丙醇上相，收集得到的异丙醇通过旋转蒸发器真空蒸馏蒸去异丙醇，加入1-4ml乙醇将固体物洗出，将所得到固体20-35℃真空干燥至干，即得山楂原花青素提取物。

优选每10克山渣，加入50mL柠檬酸溶液。

优选每10克山渣，加入50mL氯化钠溶液。

优选每10克山渣，加入50mL异丙醇。

所述的柠檬酸溶液浓度为1wt％，pH＝3。

所述的氯化钠溶液溶度为30wt％。

优选用匀浆机均质处理三次，每次2min，静置10min。

本发明的积极效果如下：