[发明专利]一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌及其悬浮剂有效
申请号: | 201510082296.0 | 申请日: | 2015-02-15 |
公开(公告)号: | CN104673720B | 公开(公告)日: | 2017-07-11 |
发明(设计)人: | 王贻莲;李纪顺;扈进冬;杨合同;谢雪迎 | 申请(专利权)人: | 山东省科学院生物研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/11 |
代理公司: | 济南舜源专利事务所有限公司37205 | 代理人: | 于晓晓 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 防治 葡萄 霜霉病 巨大 芽孢 杆菌 及其 悬浮 | ||
1.一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌,其特征在于,巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02,于2015年1月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.10478。
2.一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,将权利要求1所述的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium BMJBN02发酵得到的发酵液与表面活性剂、防腐剂、悬浮助剂和增稠剂混合制备悬浮剂。
3.根据权利要求2所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,由以下步骤制得:
(1)种子液的获得:将生防菌BMJBN02接种到液体LB培养基,30℃,200rpm振荡培养12~18小时,取样测定600nm处的OD值,测定过程中以未接种的液体LB培养基调零;
(2)发酵液的获得:当步骤(1)中OD值为0.5~0.8时,将种子液按1:150体积比加入装有发酵培养基的发酵罐培养得到发酵液;
(3)巨大芽孢杆菌BMJBN02悬浮剂的制备:将制备的BMJBN02菌的发酵液与表面活性剂、防腐剂、悬浮助剂和增稠剂混合制备悬浮剂。
4.根据权利要求3所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(1)中液体LB培养基配方:1%NaCl,1%蛋白胨,0.5%酵母粉,pH7.0~7.5。
5.根据权利要求3所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(2)中发酵条件为:培养温度30℃,转速220r/min,发酵时间为36~48h,发酵液PH维持在7.0,溶氧量30%,通气量7~9m3/小时,罐压0.05~0.1KPa,产孢率为88%,活菌计数5.33×109CFU·mL-1。
6.根据权利要求3所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(2)中发酵培养基配方:玉米粉2%,豆粕粉1%,酵母粉0.3%,CaCl2 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,K2HPO4·3H2O 0.3%,KH2PO4 0.2%,pH7.0~7.5。
7.根据权利要求3所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(3)中悬浮助剂是硫酸铵,防腐剂是甘氨酸,表面活性剂是有机硅BD-3077,增稠剂是黄原胶。
8.根据权利要求3所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(3)中,将制备的BMJBN02菌的发酵液与按质量百分比的硫酸铵6%~8%,甘氨酸2%~5%,BD-3077 0.05%~0.1%,黄原胶0.2%~0.3%混合制备悬浮剂,所得悬浮剂中BMJBN02活菌计数5×109cfu·mL-1,以上各组份的用量均以BMJBN02菌的发酵液的质量为基数。
9.根据权利要求8所述的一种用于防治葡萄霜霉病的巨大芽孢杆菌的悬浮剂,其特征在于,步骤(3)中,先将硫酸铵搅拌下加入BMJBN02菌的发酵液中,待硫酸铵全部溶解后,在搅拌下依次加入防腐剂甘氨酸、表面活性剂有机硅BD-3077、增稠剂黄原胶,搅拌均匀即可。
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