[发明专利]用于制备乳酸片球菌素Pediocin的重组菌、制备方法及应用

权利要求书

1.用于制备乳酸片球菌素Pediocin的重组菌，其特征在于所述重组菌携带由乳酸片球菌素Pediocin、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因。

2.根据权利要求1所述重组菌，其特征在于所述纯化标签通过酶切位点连接在乳酸片球菌素Pediocin的一端或两端。

3.根据权利要求2所述重组菌，其特征在于所述纯化标签是GST标签，或者所述纯化标签是由GST标签通过酰胺键与His标签相连而成；所述酶切位点是肠激酶酶切位点。

4.根据权利要求3所述重组菌，其特征在于所述纯化标签是GST标签通过酰胺键与His标签相连而成，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

5.根据权利要求3所述重组菌，其特征在于所述纯化标签是GST标签，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

6.权利要求1-5之一所述重组菌的制备方法，其特征在于将由乳酸片球菌素Pediocin、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因插入表达载体得到重组载体；将所述重组载体转化大肠杆菌，得到所述重组菌。

7.根据权利要求6所述重组菌的制备方法，其特征在于所述重组载体是将由乳酸片球菌素Pediocin、酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因插入表达载体pGEX-6P-1后获得。

8.制备乳酸片球菌素Pediocin的方法，其特征在于诱导权利要求1-5之一所述重组菌表达由乳酸片球菌素Pediocin、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白，破碎所述重组菌得到裂解液，离心取上清液，采用HisTrap HP柱和GSTrap 4B柱分离或者采用GSTrap 4B柱分离，收集含有由乳酸片球菌素Pediocin、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的洗脱峰，采用肠激酶酶解，除去酶解液中的纯化标签，得到乳酸片球菌素Pediocin。