[发明专利]一种缺失sfp基因的生防菌及其发酵工艺和应用有效
申请号: | 201510061973.0 | 申请日: | 2015-02-06 |
公开(公告)号: | CN104673716B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 缪卫国;靳鹏飞;刘文波;郑服丛;王皓楠 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P21/00;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07 |
代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司44218 | 代理人: | 杨建新 |
地址: | 570228 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 缺失 sfp 基因 生防菌 及其 发酵 工艺 应用 | ||
1.一种缺失sfp基因的生防菌,其特征在于,为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)HAB-2,保藏编号为:CCTCC M 2015070。
2.一种权利要求1所述的生防菌的发酵工艺,其特征在于,将权利要求1所述的生防菌接种于液体的溶菌肉汤培养基中,在26~30℃的条件下,50~500转/分钟摇菌1~3天,即得到发酵液。
3.根据权利要求2所述的发酵工艺,其特征在于,还包括前处理步骤:先将权利要求1所述的生防菌接种于溶菌肉汤培养基上26~30℃下活化培养1~6天。
4.一种如权利要求1所述的生防菌的发酵物活性成分的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,采用权利要求2~3任意一项所述的发酵工艺制得发酵液,然后离心除去菌体,得到无菌发酵液;
步骤2,无菌发酵液用正丁醇萃取,取萃取液,浓缩除去正丁醇,即得。
5.一种权利要求1所述的生防菌的发酵物活性成分的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.采用权利要求2~3任意一项所述的发酵工艺制得发酵液,然后离心除去菌体,得到无菌发酵液;
b,无菌发酵液用盐酸调节pH值至1.5~3,1~10℃下静置至少3h;
c,离心,弃去上清液,取沉淀,即得。
6.一种权利要求1所述的生防菌的发酵物活性成分的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)采用权利要求2~3任意一项所述的发酵工艺制得发酵液,然后离心除去菌体,得到无菌发酵液;
2)缓慢加入饱和硫酸铵,沉淀蛋白,1~10℃下静置至少3h;
3)离心得到沉淀,待沉淀干燥后用1/5~1/20原发酵液体积的、pH值为6~8的Tris-HCl溶解沉淀,即得。
7.权利要求1所述的生防菌在制备脂肽类抑菌制剂中的应用。
8.权利要求1所述的生防菌在制备防治植物真菌病害制剂中的应用,其中,所述植物真菌病害为番茄早疫病、西瓜枯萎病、香蕉枯萎病、棉花枯萎病、橡胶炭疽病、橡胶树棒孢霉落叶病、茶轮斑病、芒果炭疽病、和/或橡胶褐根病中的一种或多种。
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