[发明专利]载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种以SBA-15介孔二氧化硅纳米粒为载体，制备载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒的制备方法。

背景技术

艾塞那肽(exenatide)是一种天然肠促胰岛素类似物，首次从美国西南部大毒蜥在进食时所分泌的唾液中分离，由39个氨基酸残基组成，其与GLP-1氨基酸序列具有53％的同源性，是有效的GLP-1受体激动剂。艾塞那肽具有促进胰腺β细胞增殖、改善其功能，以及促进胰岛素分泌、增加机体对胰岛素的敏感性和延缓胃排空等作用，有着传统降糖药物不可比拟的优点。美国食品药品监督管理局(FDA)于2005年4月批准了艾塞那肽注射液在美国上市。由于其半衰期短，上市的注射液需每日注射2次，制约了其作为药品的开发和利用。为了提高患者用药的顺应性，有必要对艾塞那肽的缓释制剂进行研究，以达到长效缓释的目的。介孔二氧化硅纳米粒(mesoporous silica nanoparticles，MSNs)作为一种新型的无机介孔材料，因其具有较大比表面积和比孔容可有效的提高载药量，介孔孔径可调节药物的释放，丰富的表面硅羟基易于修饰或改性，并且MSNs具有良好的生物相容性，使其在新型给药载体领域中具有广阔的研究前景。其中，SBA-15型MSNs具有更大的孔径，易于除去模板剂，特别适合负载多肽蛋白类药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以SBA-15介孔二氧化硅纳米粒为载体，制备载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒的制备方法。

为了实现上述技术目的，本发明采用了以下技术方案：

载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)SBA-15的合成：在圆底烧瓶内加入4g三嵌段共聚物P-123，129.6g水和19.3mL浓盐酸，剧烈搅拌2h，再将烧瓶置于50℃水浴，搅拌，加入8.65g正硅酸乙酯，继续搅拌20h，随后升高温度至80℃，并让混合物静置24h；离心，水洗，在100℃下干燥12h，最后在马弗炉中500℃煅烧6h，备用；

(2)载艾塞那肽的SBA-15纳米粒的制备：在室温下，将艾塞那肽溶解于去离子水中；SBA-15溶解到多肽溶液，使其浓度为1mg/mL，将上述两种溶液混合均匀，然后将混合溶液在搅拌速度为300r/min下搅拌24h，离心，真空干燥得到载药量为(15.23±2.0)％的载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒。

本发明的另一个目的在于提供一种由上述制备方法获得的载艾塞那肽的SBA-15纳米粒。

本发明通过制备SBA-15介孔二氧化硅纳米粒作为载体材料，装载大分子多肽艾塞那肽，合成的材料至关重要。SAXRD图谱显示，通过水洗和煅烧处理的SBA-15比单用水洗处理的SBA-15的孔道更加明显，通过一系列的表征表明，处理后的SBA-15孔径大，形状规整。

本发明制备得到的艾塞那肽-SBA-15载药量高达15％，与艾塞那肽微球载药量相比(约为4％)具有巨大的优势。艾塞那肽-SBA-15体外释放结果显示，SBA-15装载艾塞那肽可使药物持续释放长达14d。药动学研究表明，艾塞那肽-SBA-15显著地提高了艾塞那肽的半衰期，由原药的0.5h提高到了14.0h。经皮下注射给药后，在体内的T_max为1.53h，大于艾塞那肽溶液组的0.48h，说明药物在SBA-15内释放缓慢，达峰时间延迟，在体内持续作用时间延长。AUC_0-t由原来的1.76ng/ml·h提高到8.20ng/ml·h，说明SBA-15可促进艾塞那肽在体内的吸收。MRT表明，药物在体内的平均滞留时间大大增加。

本发明制备的艾塞那肽-SBA-15具有载药量大，持续释放时间持久等特点，是艾塞那肽的理想载体。

附图说明

图1是高效液相色谱图(A.艾塞那肽对照品溶液；B.空白SBA-15；C.艾塞那肽-SBA-15)。

图2是艾塞那肽的标准曲线图。

图3是SBA-15介孔二氧化硅纳米粒电镜照片(×10k)。

图4是SBA-15粉末小角度X射线衍射图。

图5是SBA-15吸附-脱附等温线和孔径分布图：吸附(+)和脱附(○)。

图6是艾塞那肽-SBA-15在pH 7.4条件下的体外释放行为示意图。

图7是大鼠皮下注射后药时曲线图：(A)艾塞那肽水溶液；(B)艾塞那肽-SBA-15(n＝8)。

具体实施例

1方法与结果

1.1测定方法的建立