[发明专利]发酵中的海藻糖酶

权利要求书

1.一种提高发酵反应中从液化液生产乙醇的方法，所述方法包括：

a)用葡糖淀粉酶、发酵生物和海藻糖酶发酵所述液化液；以及

b)在所述发酵结束时回收乙醇和其它期望发酵产物，其中所述经海藻糖酶处理的发酵相比于未经海藻糖酶处理的发酵反应产生增加的乙醇，

其中所述海藻糖酶选自(i)SEQ ID No:2,和(ii)与SEQ ID NO：2具有至少99％同一性的来自里氏木霉的海藻糖酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述葡糖淀粉酶为TrG4变体，SEQ ID NO:3。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述海藻糖酶为酸性海藻糖酶。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述海藻糖酶以0.1μg/g DS至1000μg/gDS的液化液的浓度添加。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述海藻糖酶以0.25μg/g DS至100μg/gDS的液化液的浓度添加。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述海藻糖酶以0.5μg/g DS至10μg/g DS的液化液的浓度添加。

7.根据权利要求1的方法，其中在整个所述发酵反应中保持海藻糖水平低于阈值水平，其中按％wt/v计，所述阈值水平低于所述发酵开始时所述海藻糖浓度的两倍。

8.根据权利要求1的方法，其中在整个所述发酵反应中保持海藻糖水平低于阈值水平，其中按％wt/v计，所述阈值水平低于未将海藻糖酶添加到过程中时在发酵期间将存在的所述海藻糖浓度的一半。

9.根据权利要求1的方法，所述方法还包括附加酶，所述附加酶选自：酰基转移酶、酯酶、脂肪酶、氧化酶、戊聚糖酶、磷酸酶、磷脂酶、蛋白酶、和还原酶。

10.根据权利要求1的方法，所述方法包括使用海藻糖水平低于0.05％wt/v的回糟。

11.根据权利要求1的方法，所述方法包括在所述发酵反应中使用海藻糖水平低于0.1％wt/v的回糟。

12.根据权利要求10的方法，其中通过所述海藻糖酶将海藻糖从所述回糟中除去。

13.根据权利要求11的方法，其中通过所述海藻糖酶将海藻糖从所述回糟中除去。

14.根据权利要求1的方法，其中所述发酵反应包含液化液和回糟，其中在所述发酵反应中海藻糖水平低于0.01％w/v。

15.根据权利要求1的方法，其中液化包含回糟，其中海藻糖水平低于所述回糟的0.05％w/v。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中乙醇生产的增加量相比于未经海藻糖酶处理的发酵反应为0.1％v/v至1.0％v/v。

17.根据权利要求1的方法，所述方法还包括附加酶，所述附加酶选自：α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖苷酶、β-半乳糖苷酶、卡拉胶酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、软骨素酶、角质酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过氧化物酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、鼠李-半乳糖醛酸酶、普鲁兰酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶和木糖苷酶。

18.根据权利要求1的方法，所述方法还包括附加酶，所述附加酶选自：芳基酯酶、过氧化氢酶、内切-β-1,4-葡聚糖酶、内切-β-甘露聚糖酶、外切-甘露聚糖酶、角蛋白酶、酚氧化酶和脂氧合酶。