[发明专利]测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法

权利要求书

1.测量干血斑中无细胞病毒颗粒的方法，包括：

再水化干血样，其通过向干血样施加缓冲溶液以产生再水化的干血样；

任选地，使用固定剂将存在于所述再水化的干血样中的细胞固定以用细胞包含与细胞结合的RNA和/或DNA；

使用包含磷酸盐缓冲盐水（PBS）的洗脱剂将所述无细胞病毒颗粒从所述再水化的干血样中洗脱，所述洗脱剂优先地洗脱所述无细胞病毒颗粒而不破坏所述与细胞结合的RNA和/或DNA；

使用过滤器将所述无细胞病毒从可存在于所述再水化的干血样中的任何细胞碎片上分离；以及

通过病毒颗粒定量技术测量无细胞病毒颗粒，

其中所述病毒选自HIV和HTLV。

2.根据权利要求1的方法，其中所述病毒颗粒定量技术选自序列特异性核酸定量、ELISA、PCR、等温核酸扩增、核酸杂交、原位杂交和电子显微镜。

3.根据权利要求1的方法，其中所述固定剂选自甲醇、乙醇、甲醛、氯仿和丙酮。

4.根据权利要求1的方法，其中所述分离步骤包括通过离心或真空进行离心柱过滤。

5.根据权利要求1或4的方法，其中所述过滤器包含在约0.1 µm至约100 µm之间的孔径范围。

6.根据权利要求1的方法，其中所述缓冲溶液包含固定剂和洗脱剂。

7.根据权利要求1或6的方法，其中所述固定剂包含甲醇且所述洗脱剂包含PBS。

8.根据权利要求1的方法，其中所述缓冲溶液包含所述洗脱剂。

9.根据权利要求1-4、6和8中任一项的方法，其中所述方法在环境温度下进行。

10.根据权利要求5的方法，其中所述方法在环境温度下进行。

11.根据权利要求7的方法，其中所述方法在环境温度下进行。

12.根据权利要求1-4、6、8、10和11中任一项的方法，其中所述方法在不存在摇动或涡旋的条件下进行。

13.根据权利要求5的方法，其中所述方法在不存在摇动或涡旋的条件下进行。

14.根据权利要求7的方法，其中所述方法在不存在摇动或涡旋的条件下进行。

15.根据权利要求9的方法，其中所述方法在不存在摇动或涡旋的条件下进行。