[发明专利]包含PI3Kβ抑制剂和RAF抑制剂以克服癌细胞抵抗的抗肿瘤组合物

说明书

本发明涉及用于治疗抵抗至少一种RAF抑制剂的患者的PI3Kβ抑制剂与RAF抑制剂的组合、其药物用途以及当给药至患者时监测所述组合功效的方法。

磷酸肌醇3-激酶(Pl3K)是涉及诸如细胞周期、细胞运动和细胞凋亡等诸多细胞功能的信号传导分子。PI3K是产生活化若干靶蛋白的第二信使分子的脂质激酶，其包括丝氨酸/苏氨酸激酶，例如PDK1和AKT(也称为PKB)。PI3K分为三个种类且种类I包含称为PI3Kα、PI3Kβ(PI3Kβ)、PI3Kδ和PI3Kγ的四种不同PI3K。

2-{2-[(2S)-2-甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-1-基]-2-氧代乙基}-6-(吗啉-4-基)嘧啶-4(3H)-酮(下称化合物(I))是PI3Kβ同工型的一种选择性抑制剂。在使用此化合物处理之后，具有活化PI3K/AKT通道的癌细胞(例如缺失PTEN的肿瘤细胞(磷酸酶及张力蛋白同源基因，还被认为是在多种晚期癌症基因1中突变的磷酸酶及张力蛋白同源体))通常经由抑制Akt以及Akt下游效应子的磷酸化、抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤细胞死亡诱导来产生应答。若干研究显示PI3Kβ同工型是涉及PTEN-缺失肿瘤的致肿瘤性的PI3K同工型(V.Certal等人，J.Med.Chem.2012，55，4788-4805和V.Certal等人，Bioorganics&MedicinalChemistryLetters，22，(2012)6381-6384；V.Certal等人，JMedChem.57(2014):903-20)。

RAF激酶参与RAS-RAF-MEK-ERK信号转导级联，其还称作丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联。RAF激酶家族的三个成员是A-RAF、B-RAF和C-RAF。使用RAF激酶抑制剂处理的癌细胞通常经由抑制MEK和ERK的磷酸化、下调细胞周期蛋白D、诱导G1停止来产生应答，且最终发生细胞凋亡。因此，RAF已成为极受关注的用于研发癌症疗法的靶点。

1-丙烷磺酰胺,N-[3-[[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基]羰基]-2,4-二氟苯基](下称化合物(II)是RAF激酶的抑制剂。此化合物(下称化合物(II)，还称为PLX-4032或威罗菲尼(Vemurafenib))是可口服利用的小分子，其经研发用于治疗具有活化BRAF突变的癌症。更具体地，其针对具有BRAFV600E突变的黑素瘤细胞系具有明显抗肿瘤效应，但针对具有野生型BRAF并非如此。具有BRAFV600E突变的黑素瘤代表超过50％的黑素瘤。它们结构性活化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路，促进细胞增殖并预防凋亡。

在一项近期的威罗菲尼I期临床试验中，81％的具有BRAF突变黑素瘤的患者通过实体瘤治疗响应评价标准(ResponseEvaluationCriteriainSolidTumors)(RECIST)确认经历了至少30％的肿瘤收缩，并且在两名患者中具有完全响应(FlahertyKT等人，N.EnglJMed363:809-819，2010)。

然而，尽管存在此类有希望的响应，但已出现了威罗菲尼抵抗。

药物抗性是癌症化疗失败的主要原因。抗性可为先前存在的(固有抗性)或由药物诱导的(获得性抗性)。获得性抗性出现在对于治疗的瞬态响应后，其通常复发。对于靶向激酶抑制剂的获得性抗性的基因机制通常是影响靶向激酶的突变或靶向信号通路内可补偿或旁路靶向肿瘤蛋白抑制的其它基因的改变。

已研究了癌细胞对于RAF抑制剂的固有抗性。据显示，虽然PTEN表达状态不能预测对于威罗菲尼生长抑制效应的敏感性，但PTEN缺失/BRAF突变黑素瘤细胞系相比于表达PTEN的细胞系显示出显著更少的凋亡(KimH.T.Paraiso等人，CancerRes.2011；71:2750-2760)。BRAF突变和PTEN表达沉默的共同出现在人类黑素瘤中相对常见(约20-30％)。

然而，RAF抑制剂抵抗中涉及若干机制。事实上，一些BRAF突变/PTEN缺失黑素瘤细胞系对于RAF抑制剂敏感而一些其它细胞系对RAF抑制剂不敏感。

造成对威罗菲尼固有抗性或获得性抗性的机制仍在研究之中。