[发明专利]作为生物标记物的miRNA-124

说明书

至少一种miRNA作为特别是病毒感染或所述病毒感染的治疗性处理功效的生物标记物的用途，所述至少一种miRNA是miR‑124。

本发明涉及特别是与病毒感染结合的生物标记物领域。

更具体而言，本发明涉及用作病毒感染的诊断标记物的新型生物标 记物。更具体而言考虑的病毒感染是需要RNA剪接的病毒感染，且特别 是逆转录病毒感染例如HIV和AID相关状况。本发明还涉及关于所述感 染且特别是HIV和AIDS相关状况的治疗的随访标记物。

在高等真核生物中，信使RNA不以其功能形式直接转录，而是作为 前信使RNA转录，所述前信使RNA必须经历许多加工事件，以便可由细 胞翻译机制阅读。剪接是允许消除不需要的序列(内含子)，并连接有 意义的序列(外显子)的过程。高度协调的剪接事件在称为剪接体的大 复合物中发生。该功能大复合物(megacomplex)是蛋白质和RNA的精 心装配，其需要鉴定外显子-内含子边界。外显子规律地可变剪接，意 指它们或包括在最终成熟mRNA转录物中或从最终成熟mRNA转录物中排 除。近期的广泛测序研究观察到：超过90％的基因经历可变剪接。可变 剪接的mRNA的产生被反式作用蛋白质系统调节，所述反式作用蛋白质 与前mRNA自身上的顺式作用位点结合。此类蛋白质包括促进特定剪接 位点的使用的剪接激活物，和降低特定位点的使用的剪接阻遏物，分别 结合在剪接增强子位点上(内含子剪接增强子，ISE和外显子剪接增强 子，ESE)和剪接沉默子位点上(内含子剪接沉默子，ISS和外显子剪接 沉默子，ISS)。

特别是来自逆转录病毒科的病毒是全世界疾病的主因之一。可以在 逆转录病毒科中区分出三个亚科：肿瘤病毒、慢病毒和泡沫病毒。

因为肿瘤病毒可以与癌症和恶性感染相关，所以它们被这样命名。 可以提及例如致白血病病毒(例如禽白血病病毒(ALV)、鼠白血病病 毒(MULV)也称为莫洛尼病毒、猫白血病病毒(FELV)、人白血病病毒 例如HTLV1和HTLV2、猿猴白血病病毒或STLV、牛白血病病毒或BLV、 灵长类动物D型肿瘤病毒、其为乳腺肿瘤的诱导剂的B型肿瘤病毒、或 引起快速癌症的肿瘤病毒(例如劳斯肉瘤病毒或RSV)。

泡沫病毒对于给定细胞类型或给定物种表现相当低的特异性，并且 它们有时与免疫抑制现象相关；这是例如对于猿猴泡沫病毒(或SFV) 的情况。

因为慢病毒例如HIV负责缓慢进展的病理状况，所以它们被这样命 名，所述病理状况非常频繁地涉及免疫抑制现象，包括AIDS。

已知病毒且特别是逆转录病毒例如HIV依赖RNA剪接和剪接调节， 以便在受感染个体的细胞和组织内传播和散布。

近来，已利用HIV是需要RNA剪接以表达关键病毒蛋白质的逆转录 病毒的这一事实来开发基于剪接抑制的新型策略，以对抗病毒感染且特 别是AIDS(WO 2010/143169)。事实上，HIV-1基因组表达9kb的初 级转录物，其不仅充当子代病毒的基因组RNA，还生成40种不同的mRNA。 HIV-1使用四个多重可变5’剪接位点和八个多重可变3’剪接位点，以 生成剪接的mRNA种类。这些剪接的mRNA可以分成两类：多重剪接的(2 kb)和单一剪接的(4kb)RNA。HIV-1可变剪接的调节主要由于亚最佳 剪接位点的存在而发生，所述亚最佳剪接位点减少通过剪接信号的细胞 剪接机制的识别。在病毒剪接位点处的剪接进一步通过ESE、ESS和ISS 的存在得到调节。

在这个背景下，已开发了喹啉衍生物，特别是8-氯-N-[4-(三氟甲 氧基)苯基]喹啉-2-胺，其已显示在nM浓度范围下抑制HIV-1和HIV-2 T细胞向性实验室株的外周血单核细胞(PBMC)以及不同亚型的临床分 离物中的复制(WO 2010/143169)。