[发明专利]用于产量增加的方法中的重组体微生物

权利要求书

1.重组酵母细胞，尤其是转基因的酵母细胞，其功能性表达一种或多种重组体，尤其是编码1,5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶(Rubisco)和磷酸核酮糖激酶(PRK)的异源核酸序列。

2.根据权利要求1所述的重组酵母细胞，其中，所述酵母细胞进一步包含一种或多种原核分子伴侣，所述伴侣优选来源于细菌，更优选地来源于大肠埃希氏菌(大肠杆菌)。

3.根据权利要求1或2所述的重组酵母细胞，其中，所述伴侣选自由GroEL、GroES、GroEL的功能性同源物和GroES的功能性同源物组成的组。

4.根据前述权利要求中任一项所述的重组酵母细胞，其中，所述Rubisco为单一亚单位Rubisco。

5.根据前述权利要求中任一项所述的重组酵母细胞，其中，所述Rubisco为原核II型Rubisco。

6.根据前述权利要求中任一项所述的重组酵母细胞，其中，所述酵母细胞选自酵母科，例如酿酒酵母、巴斯德酵母、布拉迪酵母、发酵酵母、奇异酵母、葡萄汁酵母和贝酵母；裂殖酵母属，例如粟酒裂殖酵母、日本裂殖酵母,八孢裂殖酵母和嗜冷裂殖酵母；有孢圆酵母属，例如德布尔有孢酵母；克鲁维酵母属，例如马克斯克鲁维酵母；毕赤酵母属，例如树干毕赤酵母、巴斯德毕赤酵母或安格斯毕赤酵母；接合酵母属，例如拜耳接合酵母；酒香酵母属，例如间型酒香酵母、布鲁塞尔酒香酵母、异型酒香酵母、班图酒香酵母、纳氏酒香酵母、Brettanomycesnanus、布鲁塞尔德克酵母和异型德克酵母；梅奇酵母属，东方伊萨酵母，例如东方伊萨酵母、克勒克酵母例如柠檬形克勒克酵母；海洋酵母属，例如出芽短梗霉，优选酿酒酵母细胞。

7.根据权利要求6所述的重组酵母细胞，其中，所述酵母细胞选自由酵母科组成的组。

8.根据权利要求7所述的重组酵母细胞，其中，所述酵母细胞选自由酿酒酵母、巴斯德酵母、布拉迪酵母、发酵酵母、奇异酵母、葡萄汁酵母和贝酵母组成的组。

9.根据前述权利要求中任一项所述的重组酵母细胞，其中，所述PRK是来源于真核细胞的PRK。

10.根据权利要求9所述的重组酵母细胞，其中，所述PRK来源于来源于石竹目，尤其是苋科，尤其是菠菜的植物。

11.根据前述权利要求中任一项所述的重组酵母细胞，其中，所述Rubisco具有至少1nmol.min^-1.(mg蛋白)(在30℃，如可通过实施例4中所述方法确定的)的活性，所述活性由细胞提取物结合1,5-二磷酸核酮糖-依赖性¹⁴C-碳酸氢盐的速率来定义。

12.用于在酵母细胞中功能性表达异源多肽的一种或多种载体，其中，所述一种或多种载体包含编码Rubisco和PRK的一种或多种异源核酸序列，其中所述Rubisco显示出固碳活性。

13.用于制备醇、有机酸或氨基酸的方法，包括发酵碳源，尤其是将碳水化合物与根据权利要求1-11中任一项所述的酵母细胞一起发酵，从而形成所述醇、有机酸或氨基酸，其中所述酵母细胞存在于反应介质中。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述反应介质包含二氧化碳，其中所述反应介质中的所述二氧化碳浓度为所述二氧化碳饱和浓度的至少5％，尤其是至少10％，更加尤其是至少20％。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中，形成乙醇。

16.二氧化碳作为电子接受体在重组体化养微生物，尤其是化养真核微生物中的用途。