[发明专利]一种复合菌剂及其制产纤维素酶的方法在审
| 申请号: | 201410759440.5 | 申请日: | 2014-12-11 |
| 公开(公告)号: | CN104403980A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
| 发明(设计)人: | 王小芬;崔宗均;刘晶晶;王小娟;袁旭峰;朱万斌 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/14;C12N9/42;C12R1/145;C12R1/01;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 复合 及其 纤维素酶 方法 | ||
1.一种复合菌剂,其特征在于,是由缓纤维梭菌、解木聚糖拟杆菌、噬纤维菌、灰盖鬼伞菌分别接种于培养基,发酵培养后将发酵液混合得到的发酵混合液;
其中所述发酵混合液中缓纤维梭菌、解木聚糖拟杆菌、噬纤维菌、灰盖鬼伞菌的菌落形成单位数目比为20-25:15-20:15-20:40-50,菌落形成单位数目为0.8×106-1.2×106CFU;
所述发酵培养条件为:33-37℃静止培养7d。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂,其特征在于,所述缓纤维梭菌(Clostridium lentocellum),其保藏编号为ATCC 49066;
所述解木聚糖拟杆菌(Bacteroides xylanisolvens),其保藏编号为DSM 18836;
所述噬细胞菌(Cytophaga sp.),其保藏编号为ATCC13125;
所述灰盖鬼伞菌(Coprinus cinereus),其保藏编号为CGMCC NO.4051。
3.根据权利要求1所述的复合菌剂,其特征在于,所述培养基为Mandels培养基,其配方如下:
同时在培养基中添加小麦秸秆作为唯一的碳源,长度为2-3cm,添加量为前述培养基总质量的1%。
4.根据权利要求1-3任一所述的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂还可制成固体剂型,所述固体复合菌剂是由上述发酵混合液与载体按0.8×106-1.2×106CFU:(1-10)g比例配制而得;优选所得发酵混合液与载体按1×106CFU:5g比例配制。
5.根据权利要求4所述的复合菌剂,其特征在于,所述载体为麦饭石和/或秸秆粉。
6.一种制产纤维素酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将秸秆粉碎与培养基混合,115-120℃灭菌15-30min,冷却;
2)将权利要求1-5任一所述的复合菌剂接种到步骤1)所得体系中,每天搅拌一次,30-35℃培养7-10天,将发酵产物真空干燥,得到固态纤维素复合酶。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述秸秆为水稻、小麦、玉米或其它木质纤维素材料,长度<1mm。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述培养基配方为(g/l):
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述秸秆与培养基混合比例为5-10:15-20(g/ml),优选为10:15(g/ml)。
10.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述复合菌剂接种量为每千克培养基中菌落形成单位数目为0.16×106-0.24×106CFU。
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