[发明专利]一种复合菌剂及其制产纤维素酶的方法在审

专利信息
申请号: 201410759440.5 申请日: 2014-12-11
公开(公告)号: CN104403980A 公开(公告)日: 2015-03-11
发明(设计)人: 王小芬;崔宗均;刘晶晶;王小娟;袁旭峰;朱万斌 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/14;C12N9/42;C12R1/145;C12R1/01;C12R1/645
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 复合 及其 纤维素酶 方法
【权利要求书】:

1.一种复合菌剂,其特征在于,是由缓纤维梭菌、解木聚糖拟杆菌、噬纤维菌、灰盖鬼伞菌分别接种于培养基,发酵培养后将发酵液混合得到的发酵混合液;

其中所述发酵混合液中缓纤维梭菌、解木聚糖拟杆菌、噬纤维菌、灰盖鬼伞菌的菌落形成单位数目比为20-25:15-20:15-20:40-50,菌落形成单位数目为0.8×106-1.2×106CFU;

所述发酵培养条件为:33-37℃静止培养7d。

2.根据权利要求1所述的复合菌剂,其特征在于,所述缓纤维梭菌(Clostridium lentocellum),其保藏编号为ATCC 49066;

所述解木聚糖拟杆菌(Bacteroides xylanisolvens),其保藏编号为DSM 18836;

所述噬细胞菌(Cytophaga sp.),其保藏编号为ATCC13125;

所述灰盖鬼伞菌(Coprinus cinereus),其保藏编号为CGMCC NO.4051。

3.根据权利要求1所述的复合菌剂,其特征在于,所述培养基为Mandels培养基,其配方如下:

同时在培养基中添加小麦秸秆作为唯一的碳源,长度为2-3cm,添加量为前述培养基总质量的1%。

4.根据权利要求1-3任一所述的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂还可制成固体剂型,所述固体复合菌剂是由上述发酵混合液与载体按0.8×106-1.2×106CFU:(1-10)g比例配制而得;优选所得发酵混合液与载体按1×106CFU:5g比例配制。

5.根据权利要求4所述的复合菌剂,其特征在于,所述载体为麦饭石和/或秸秆粉。

6.一种制产纤维素酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)将秸秆粉碎与培养基混合,115-120℃灭菌15-30min,冷却;

2)将权利要求1-5任一所述的复合菌剂接种到步骤1)所得体系中,每天搅拌一次,30-35℃培养7-10天,将发酵产物真空干燥,得到固态纤维素复合酶。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述秸秆为水稻、小麦、玉米或其它木质纤维素材料,长度<1mm。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述培养基配方为(g/l):

9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述秸秆与培养基混合比例为5-10:15-20(g/ml),优选为10:15(g/ml)。

10.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述复合菌剂接种量为每千克培养基中菌落形成单位数目为0.16×106-0.24×106CFU。

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