[发明专利]一种稳定性强的单试剂血清甘油三酯检测试剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种稳定性强的单试剂血清甘油三酯检测试剂，属于临床体外检测技术领域。

背景技术

甘油三酯（TG）是血脂的主要组成部分，是机体重要的供能物质。食物中的甘油三酯在肠道经胰脂酶消化分解，吸收后重新酯化为甘油三酯，经淋巴系统进入血液。肝脏是合成甘油三酯的主要场所，脂肪组织是最大的甘油三酯储存库。在病理条件下，各种组织细胞合成和储集的甘油三酯显著增加。定量检测血液和组织细胞中甘油三酯含量，是临床、临床基础、基础医学生物学研究常用的生化指标。

目前血清TG检测方法众多，一般可分为化学法、酶法和色谱法3大类。化学法是用有机溶剂抽提标本中的TG，去除抽提液中磷脂等干扰物后，用碱水解(皂化)TG，以过碘酸氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测甲醛。比较准确的是二氯甲烷硅酸变色酸法(VanHande-Caslson法)，但是操作比较复杂，技术要求高，不适于临床常规分析中应用；而色谱法对仪器和操作人员的要求非常的高，且分析成本昂贵，因此化学法和色谱法不利于临床推广。

国内几乎所有的临床检测主要采用酶法检测血清中TG含量，其主要工作原理如下：脂肪酶分解血清中甘油三酯为甘油与脂肪酸。在ATP存在下，甘油激酶将甘油磷酸化生成3-磷酸甘油。后者被磷酸甘油氧化酶氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢。过氧化氢与过氧化物酶、4-氨基比林进行显色反应，生成有色苯醌亚胺，在480~550 nm处吸光度值与甘油三酯浓度成正比。此法具有简便快速、微量、精密度高的优点，且特异性强，易于达到终点，线性范围宽，有利于临床推广。市面上一般比较多的是双试剂的TG检测试剂，而单试剂的TG检测试剂由于其稳定性较差，并且试剂极其容易受到环境的污染而不为市场所接受。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种稳定性强的单试剂血清甘油三脂检测试剂。

本发明采用以下技术方案：

一种稳定性强的单试剂血清甘油三脂检测试剂，其特征在于，所述试剂包括：50-60mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸-谷氨酸钠缓冲液（pH=7.4）、1-5g/L牛血清白蛋白、0.1-1g/L十二烷基硫酸三乙醇胺、0.1-1g/L过苯甲酸钠、1-2g/L辅酶FAD、0.1-1g/L聚乙烯醇 AH-26、10-100mmol/L乙二胺四乙酸二钠、3.5-5mmol/L胆酸钠、17.5-20.5mo/Ll七水合硫酸镁、1-3mmol/L 4-氨基安替比林、3.5-5mmol /L N，N-二甲基苯胺、0.1-1g/L TritonX-100、1-3KU/L脂蛋白脂肪酶、0.25-500KU/L甘油激酶、1-3KU/L过氧化物酶、1-3KU/L甘油-3-磷酸氧化酶、0.1-1g/L叠氮钠。

作为本发明的一种优选，所述试剂中包括：50mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸-谷氨酸钠缓冲液（pH=7.4）、3g/L牛血清白蛋白、0.5g/L十二烷基硫酸三乙醇胺、0.5g/L过苯甲酸钠、1.5g/L辅酶FAD、0.5g/L聚乙烯醇 AH-26、50mmol/L乙二胺四乙酸二钠、4mmol/L胆酸钠、18mol/L七水合硫酸镁、2mmol/L 4-氨基安替比林、4.5mmol /L N，N-二甲基苯胺、0.5g/L TritonX-100、2KU/L脂蛋白脂肪酶、300KU/L甘油激酶、2KU/L过氧化物酶、2KU/L甘油-3-磷酸氧化酶、0.5g/L叠氮钠。

本发明试剂的制备方法是将各组分依次溶于1L蒸馏水中制备完成。

本发明的有益效果是：

1）本发明选择了4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）-谷氨酸钠缓冲液，本缓冲体系在pH值为6.8-8.2范围内具有良好的缓冲能力，使整个配方处于一种极其稳定的状态，提高了试剂的稳定性。

2）本发明试剂中分别添加十二烷基硫酸三乙醇胺，它能有效的保护脂蛋白脂肪酶的稳定性；此外，试剂中加入了辅酶FAD和聚乙烯醇 AH-26，它们能够有效地保护甘油-3-磷酸氧化酶中酶的活性基团使酶不易失活，从而提高酶的稳定性。

4）本发明中选取稳定性较强，不易分解的N，N-二甲基苯胺作为色原，替代原有4-氯苯酚，有效的减缓试剂空白升高的弊病，从而保证了试剂的稳定性。

5）本发明中还在试剂中加入了具有弱氧化性质的过苯甲酸钠，能够有效地去除抗坏血酸、胆红素等还原性物质对生化试剂还原性物质的干扰，从而提高试剂的抗干扰能力和稳定性。

附图说明

图1是本发明实施例1-3与对照组7天37℃热稳定性试验结果图；