[发明专利]一种生物相容性量子点的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种生物相容性量子点的制备方法，具体步骤如下：

A、合成CdSe：氮气保护下，39.5mg-158mg硒粉，溶解于50mL液体石蜡中，温度逐渐增加到200℃；剧烈搅拌1小时后，Se混合物冷却致100℃；将0.32g-1.28gCdO和2.85g-11.4g硬脂酸溶解在5ml液体石蜡中，氮气保护下160℃搅拌，得到硬脂酸混合物；当硬脂酸混合物变成亮黄色时，迅速注入Se混合物并迅速增加混合物温度至200℃；90分钟后，反应物的温度降低到60℃，添加50mL氯仿至彻底混合；然后将反应物离心8000转/分钟10分钟，弃上清液；添加50mL的乙醇混合均匀；再次离心后，乙醇再次洗涤沉淀；沉淀物烘干后储存于黑暗环境中，得到CdSe；

B、合成CdSe/ZnS:在离心管中，2g步骤A得到的CdSe分散在20毫升氯仿中超声1小时；溶液被注入到反应瓶中，保持温度135℃3小时，以完全蒸发氯仿；在另一容器中，45μl-180μl二乙基锌和41μl-164μl六甲基二硅硫烷添加到2.5mL三正辛基氧化磷TOPO中混合均匀；温度达到180℃后，将其慢慢注入反应瓶；添加完成后，溶液温度降低到90℃继续搅拌数小时；加入5mL氯仿防止TOPO固化；冷却到室温，反应混合物在10mL氯仿中重新溶解，转移到离心管，加入同等体积的乙醇5000rpm/min×10min离心两次，烘干并定量；加入10ml去离子水防止氯仿蒸发，得到CdSe/ZnS；

C、合成两性聚合物：室温下，将0.2g聚丙烯酸MW1,800添加到一个含10毫升N,N-二甲基甲酰胺的烧瓶中；搅拌1小时，加入137μl辛胺，搅拌30分钟；将0.47g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺溶解于0.5毫升DMF后缓慢滴入反应体系，反应过夜以合成两性聚合物；0.25M盐酸滴加到聚合物溶液中，剧烈搅拌，形成不透明乳状的胶体溶液；胶体以8000rpm/min离心10min，去掉上清液，胶状沉淀用0.25MHCl洗涤两次；沉淀物冷冻干燥成白色粉末，即两性聚合物Polymer；

D、CdSe/ZnS-Polymer合成：将0.45mmol两性聚合物粉末在2.0mLMES缓冲液中重悬，将200μl0.15mmolCdSe/ZnS溶解在两性聚合物溶液中，加入到盛有8ml去离子水的开放容器中；搅拌超声30分钟，直到氯仿完全蒸发；得到的水化胶质用层析法进一步纯化，获得终产物CdSe/ZnS-Polymer。

2.根据权利要求1所述的一种生物相容性量子点的制备方法，其特征在于：步骤A中加入的硒粉为79mg，加入的CdO为0.64g，加入的硬脂酸为5.7g；步骤B中加入的二乙基锌为90ul，加入的六甲基二硅硫烷为82ul。

3.一种如权利要求1所述的生物相容性量子点的制备方法制备得到的生物相容性量子点。

4.一种如权利要求3所述的生物相容性量子点在制备细胞标记物中的应用。

5.根据权利要求4所述的生物相容性量子点在制备细胞标记物中的应用，其特征在于，所述的应用，是利用CdSe/ZnS-Polymer对干细胞进行细胞标记。