[发明专利]一种液态复合菌剂的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种液态复合菌剂的制备方法,其特征在于：1）选取菌株接种至无机盐液培养基，所述的菌株为以α-蒎烯为碳源筛选得到的降解菌Pseudomonas veronii ZW，以1-氯苯为碳源筛选得到的降解菌Ralstonia pickettii L2，以二氯甲烷为碳源筛选到的降解菌Pandoraea pnomenusa LX-1，以邻二甲苯为碳源筛选到的降解菌Zoogloea resiniphila HJ1，以小分子有机酸为碳源筛选到的降解菌Staphylococcus pasteuri LWX，分别以α-蒎烯、1-氯苯、二氯甲烷、邻二甲苯和乙酸为唯一碳源进行培养，从而获得不同菌株的菌悬液；2）各种菌的菌悬液离心、洗涤、稀释后获得菌体浓度值相等的各种菌的菌液，将这些菌液等体积混合均一，获得液态复合菌剂的接种液；3）配制无机盐培养液，pH6.8-7.5，以α-蒎烯、1-氯苯、二氯甲烷和邻二甲苯的混合化合物为底物，接入接种液，摇床振荡培养或发酵罐培养，温度控制在30℃，培养24-48h后获得处于生长对数期的菌液；4）加入酵母粉和蛋白胨，得液态复合菌剂，冰箱4℃保存。

2.根据权利要求1所述的液态复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的无机盐培养液其配方为（g/L）:KH₂PO₄ 0.376，K₂HPO₄·3H₂O 0.456，(NH₄)₂SO₄ 0.484，NaNO₃ 0.68，Mg(NO₃)₂ 0.256，CaCl₂ 0.011，MnCl₂·H₂O 0.06，ZnCl₂ 0.088，KI 0.01，NaMoO₄·2H₂O 0.1，H₃BO₃ 0.05，pH=7.2。

3.根据权利要求1所述的液态复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的各种菌的菌悬液在12000g条件下离心后，收集菌体，并用无菌水洗涤3次，加入一定体积的无菌水，获得菌体浓度值相等的各种菌的菌液，浓度范围为500mg/L-2g/L，将这些菌液以等体积混合均一，获得液态复合菌剂的接种液。

4.根据权利要求1所述的液态复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的酵母粉添加浓度为500mg/L-2g/L，蛋白胨添加浓度500mg/L-2g/L。

5.根据权利要求1所述的液态复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的菌株Staphylococcus pasteuri LWX降解其他共存菌株代谢有机物产生的小分子有机酸，维持整个体系的pH呈弱酸性或者中性。

6.一种如权利要求1所述方法制备的液态复合菌剂在苯类及含氯VOCs气体的污染治理中的应用，在使用过程中无需调节体系的pH。