[发明专利]一组核苷酸序列及在单增李斯特菌鉴定中的应用

权利要求书

1.一种核苷酸序列组合，由SEQ ID NO:1、3-7组成，其中SEQ ID NO:4和7不同时存在。

2.根据权利要求1所述的核苷酸序列组合，所述组合由SEQ ID NO:1、3-6组成。

3.根据权利要求1所述的核苷酸序列组合，所述组合由SEQ ID NO:1、3、5-7组成。

4.根据权利要求1-3中任一所述的核苷酸序列组合在交叉恒温扩增反应中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，所述交叉恒温扩增反应可分为以下步骤：

(1)提取待检测样本的DNA模板；

(2)将步骤(1)获得的DNA模板放入交叉恒温扩增反应体系中扩增；

(3)检测步骤(2)获得的扩增产物。

6.根据权利要求5所述的应用，所述交叉恒温扩增反应的反应体系总体积为20μl，其中含有：0.3mM SEQ ID NO:1，1.44mM SEQ ID NO:3，1.44mM SEQ ID NO:4，0.3mM SEQ ID NO:5，2.4mM SEQ ID NO:6，以及20mM Tris-HCl(pH 8.8),10mM KCl,4mM MgSO₄,10mM(NH₄)₂SO₄,0.1％Tween 20,0.8M甜菜碱,1.4mM dNTPs,1μl of Bst DNA聚合酶(8U/mL),1μl Loopamp荧光染料(FD)和1μl DNA模板，反应温度64℃，反应时间为90分钟。

7.根据权利要求5所述的应用，所述交叉恒温扩增反应的反应体系总体积为20μl，其中含有，0.3mM SEQ ID NO:1，1.44mM SEQ ID NO:3，0.3mM SEQ ID NO:5，2.4mM SEQ ID NO:6，1.44mM SEQ ID NO:7，以及20mM Tris-HCl(pH 8.8),10mM KCl,4mM MgSO₄,10mM(NH₄)₂SO₄,0.1％Tween 20,0.8M甜菜碱,1.4mM dNTPs,1μl of Bst DNA聚合酶(8U/mL),1μl Loopamp荧光染料(FD)和1μl DNA模版，反应温度64℃，反应时间为90分钟。

8.根据权利要求5所述的应用，所述步骤(3)可以为目测、浊度仪检测、或琼脂糖凝胶电泳检测。

9.根据权利要求5所述的应用，所述待检测样本可以为细菌培养物、体液或人体分泌物样本。