[发明专利]一种香薷总黄酮的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种香薷总黄酮的制备方法及其应用。

背景技术

香薷，又名香菜、香茅，为唇形科石荠苧属植物，具有解表、化湿、祛暑、消肿之功效，临床主要用于恶寒发热、腹痛吐泻、小便不利等症状的暑湿感冒。香薷含有多种黄酮类化合物成分，据研究，香薷全草中含有7-甲基黄芩素、芹菜素、木犀草素、咖啡酸和槲皮素等黄酮类化合物。

黄酮类化合物具有降脂、抗衰老、抗氧化、抗血栓、清除自由基、抗心律失常、抗癌等功效。目前，对香薷化学成分的研究主要集中在挥发油，对其黄酮类成分的研究少见报道。

传统的提取方法包括溶剂提取、沉淀分离法、水蒸气蒸馏法、分子蒸馏技术等。虽然这些方法在天然产物提取被大多数人采用，但也存在不少缺点，如提取过程中普遍使用大量有机溶剂；处理时间长；操作步骤多等。因而实验过程中样品损失严重，产生的误差较大。

本发明采用现代的超声提取技术，快速高效的提取香薷总黄酮。且通过文献检索， 国内尚未见香薷总黄酮用于制备抗肿瘤药物。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤疾病，本发明提供一种香薷总黄酮的制备方法及其抗肿瘤应用。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

a.将香薷全草阴干、粉碎，过40目筛；

b.将处理后的原料置于频率为20KHz的超声装置中，加入原料3~4倍的70~80%的乙醇溶液，设置超声温度为70~80℃，时间为2~3h，过滤，滤渣重复提取1次，合并滤液；

c.将合并的滤液浓缩至原体积的1/8~1/10，浓缩液加入大孔吸附树脂柱纯化，先用2~3BV的蒸馏水洗脱，再用65~75%的乙醇洗脱，收集洗脱液；

d.洗脱液浓缩，干燥，即得香薷总黄酮。

步骤c中所述的大孔吸附树脂类型为AB-8、HPD100、XDA-1中的一种。

通过体外肿瘤细胞抑制试验，观察香薷总黄酮的抗肿瘤作用，结果表明香薷总黄酮对GLC4肺癌和COLO结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。

本发明的有益效果通过以下实验得到了验证：

实验方法：

1、受试提取物：香薷总黄酮

2、细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株COLO。 

3、给药剂量和方法

香薷总黄酮组：10mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。

阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。

阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注给药，隔一天一次，共五天。

灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。

4、种植瘤模型的建立与给药

（1）皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2×10 ⁶细胞悬液，注射至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对模型动物存活率的影响。

（2）肺内种植瘤肺转移模型：取2×10 ⁶细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15天取肺，测量瘤重和肺转移数。

（3）给药方式：种植瘤细胞同时给药。

5、结果

结果如表1、表2和表3显示，香薷总黄酮组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的作用，可延长实验小鼠的生存期。

 

表1  香薷总黄酮对种植瘤的抑制作用（n=20，                                                ±S）

表2  香薷总黄酮对肿瘤转移发生率的影响（n=20，%）

表3  香薷总黄酮对实验小鼠生存率的影响（n=20，%）

由表1、表2和表3可以看出，香薷总黄酮组用药抑制肿瘤生长、转移的效果强于阳性对照组，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于阴性对照组。

本发明用于制备抗肿瘤药物时，将香薷总黄酮与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。

本发明用于制备抗肿瘤药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。