[发明专利]一种不含雌激素的林蛙油及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材，特别是涉及一种不含雌激素的林蛙油及其制备方法。

背景技术

林蛙油俗称哈士蟆油，系采集干燥蛙科动物中国林蛙雌蛙的输卵管制得。林蛙油主要含有蛋白质、多糖、脂类、多种无机元素、维生素和多种复合多肽等生物活性因子，特别富含三种性激素，即雌二醇、睾酮和孕酮。现代医学研究表明，林蛙油具有抗疲劳、抗衰老、调节人体内分泌等多种药理保健作用；其有促进卵泡早熟及卵泡增殖作用，对性周期有明显的影响；同时其有补虚、增精、退热之功效，可治精血不足，体虚气弱、肺虚咳、神经衰弱、记忆减退、产后无乳、乳汁不足以及肺结核、肝炎等消耗性疾病，特别对老年人的康复作用更佳。

近年临床观察显示子宫肌瘤是一种依附于雌激素生长的肿瘤。床常见于育龄妇女，30～50岁多见，尤其是在高雌激素外围中，如妊娠、外源性高雌激素等情况下生长明显，而绝经后肌瘤渐渐收拢。肌瘤患者又常伴卵巢充血、胀大、子宫内膜增生过长，提示这与过多雌激素刺激有关。此外，目前性早熟也是困扰很多家长的问题，儿童性早熟与体内雌激素水平较高关系密切。

由于林蛙油含有较高的雌激素水平，导致其在使用时需要考虑使用者的激素水平，这限制了其应用范围。

因此为了满足高雌激素水平人群的需要，开发一种不含雌激素的林蛙油，具有重大的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种不含雌激素的林蛙油及其制备方法，该制备方法简单，得到林硅油不含雌激素，可以用于开发药品，食品和保健食品。

本发明的技术方案具体如下。

本发明提供一种不含雌激素的林硅油的制备方法，具体步骤如下：

(1)将干燥的林蛙油用中药粉碎机粉碎成30-60目粗粉，在粗粉中加入提取剂，于40-70℃温度下搅拌提取2-5小时后，放出提取液，用板框过滤，上述提取过程重复3-6次；之后合并过滤后的提取液，真空旋转蒸发，得到提取液的浓缩物；再将上述提取后的粗粉减压抽滤，真空干燥，得干燥的林蛙油粗粉；其中：每次提取时，每1g林蛙油粗粉所用的提取剂为5-10ml，所述提取剂选自乙酸C₁-C₆烷酯、C_1-C₄脂肪醇、氯仿、二氯甲烷、乙醚或丙酮中任一种或多种；

(2)将步骤(1)得到的提取液的浓缩物用有机溶剂溶解后，向其中加入100-200目层析硅胶拌样，之后室温下挥干溶剂制样；另取200-300目层析硅胶干法装入层析柱，以C₄-C₈烷烃和乙酸C₁-C₆烷酯、或者石油醚和乙酸C₁-C₆烷酯的混合溶剂按照体积比为4:1至1:5进行梯度洗脱，将不含雌二醇、睾酮和孕酮的流份合并收集浓缩，得浓缩物；

(3)以乙酸乙酯溶解不含有雌二醇、睾酮和孕酮的流份的浓缩物，并和步骤(1)中得到的干燥的林蛙油粗粉充分混合，真空干燥，得干燥的不含雌激素的林蛙油粗粉。

上述步骤(2)中所述有机溶剂为乙酸乙酯。

上述步骤(3)中，真空干燥时，温度为40-70℃，时间为12-48小时。

本发明还提供上述制备方法获得的不含雌激素的林蛙油。它是一种灰白色粉末，由林蛙油通过乙酸C₁-C₆烷酯，或C_1-4脂肪醇，或氯仿、二氯甲烷、乙醚、丙酮等溶液提取，浓缩，层析分离、混合干燥得到。

本发明的有益效果在于：本发明林蛙油可用于高雌激素人群的药品、食品及保健食品的开发。

附图说明

图1为本发明方法的工艺流程示意图。

具体实施方式

将10Kg干燥的蛤蟆油以中药粉碎机打成30-60目粗粉，用于以下加工处理。

取10Kg蛤蟆油粗粉，加入100升提取罐中，加入80升乙酸乙酯，50℃搅拌提取2小时，放出提取液，提取液经板框过滤。按上述方式提取4次。合并过滤后的提取液，在70℃真空浓缩至干。提取后的蛤蟆油粗粉经减压抽滤，50℃真空干燥24小时，得干燥蛤蟆油粗粉。提取液浓缩物以800ML乙酸乙酯溶解，加入600克100-200目层析硅胶拌样，室温下挥干溶剂。另取6公斤200-300目层析硅胶干法装入层析柱(直径20cm，高100cm)，以正己烷-乙酸乙酯(体积比)4:1-1:5梯度洗脱，收集含有雌二醇、睾酮、孕酮的流份，合并收集不含雌二醇、睾酮、孕酮的流份，在70℃真空浓缩得到含有雌二醇、睾酮、孕酮的浓缩物和不含有雌二醇、睾酮、孕酮的浓缩物。以5升乙酸乙酯溶解不含有雌二醇、睾酮、孕酮的浓缩物，与上述干燥的蛤蟆油粗粉充分混合，50℃真空干燥24小时，得干燥的不含雌激素的蛤蟆油粗粉，经薄层层析检测，该蛤蟆油粗粉中均未检出雌二醇、睾酮、孕酮。