[发明专利]一种使用UPLC-MSMS检测食品中乌洛托品含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，特别是一种使用UPLC-MS/MS检测食品中违禁添加剂乌洛托品的检测方法。

背景技术

乌洛托品（HMTA)别名六亚甲基四胺，它可作为缓蚀剂、固化剂、防缩剂和杀菌剂等。乌洛托品本身是低毒的，但在弱酸的条件下，乌洛托品能分解出具有毒性的甲醛，同时甲醛在体内还可还原为甲醇，故也表现出甲醇的毒理作用。对人体的肾、肝、中枢神经、免疫功能、消化系统等均有损害。

由于近年来，国内多次报道从腐竹、粉丝、米线、水产品等食品中检测出乌洛托品而引起一系列的食品安全事件，因此于2010年3月乌洛托品被全国食品安全整顿工作办公室被列为《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中，被明文禁止添加到食品当中或加工食品过程中使用。

在我国食品安全矛盾突出的背景下，国家对于食品安全问题执法力度不断加强的背景下，对于此项存在的食品安全隐患需要加急应对。

然而目前在乌洛托品的检测主要集中在水和药物制剂两个方面，对于基体相对复杂的食品中检测方法研究较少。黄国春(气相色谱法测定腐竹中乌洛托品含量的研究[J]广西轻工业，2008(6)，26-27）报道了用三氯甲烷提取、气相色谱氢火焰离子化检测器检测腐竹中乌洛托品，方法检测限为0.7mg/kg。但其处理方法(气相色谱-质谱GC-MS)所需检测时间较长，方法检测限界较低，且单独采用气象色谱测定对基体相对复杂的食品结果不够精准，而现行标准SN/T2226-2008其方法限界同样存在限界较低问题；对于目前食品安全执法中遇到的仲裁检测以及确认略显不足。对此寻找一种符合当前状况的检测方法尤为必要。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明建立了一种超高压液相色谱—串联质谱（UPLC-MS/MS）测定食品中乌洛托品的分析方法，通过对不同基质样品进行前处理后，在每3min左右完成一个样品的分析，检出限可达0.5μg/kg（LOD，S/N=3），方法回收率为86.8%~102.7%，比SN/T2226-2008提高10倍；精密度RSD为0.36%～4.79%，数值可信。能高效、灵敏、准确的适用于各类食品中乌洛托品的测定。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

（1）标准溶液的配置：准确称取乌洛托品标准品0.001g，用超纯水溶解并定容至100mL，摇匀备用，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液。

（2）色谱条件：HILIC色谱柱（50mm×2.1mm，1.7μm），柱温35℃，流速0.25mL/min；进样量5μL；流动相为乙腈和10mmol/L的乙酸铵溶液（pH=3.5）（80/20，V/V），等度洗脱。

（3）质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子扫描模式；碰撞气（CAD）为8psi；气帘气（CUR）为20psi；雾化气（GS1）为45psi；辅助加热器（GS2）为60psi；喷雾电压（IS）为5500V；离子源温度（TEM）为150℃。

（4）标准曲线的绘制：取（1）所述的乌洛托品系列标准溶液，选择流动相为乙腈和乙酸铵，通过固相萃取柱以峰面积Y对浓度X（μg/L）作标准曲线。

含油脂较高的样品在液质检测时就会造成非常大的基质效应，使得回收率极大的降低，对检测结果产生了严重的干扰，所以必须去除样品中的脂溶性物质。本发明以脂肪含量≥20%为区分脂肪含量高低限界，选取的样品的脂肪含量如下表1：