[发明专利]一种使用UPLC-MSMS检测食品中乌洛托品含量的方法

权利要求书

1.一种使用UPLC-MS/MS检测食品中乌洛托品含量的方法，其特征包括以下步骤：

（1）标准溶液的配置：准确称取乌洛托品标准品0.001g，用超纯水溶解并定容至100mL，摇匀备用，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液；

（2）色谱条件：HILIC色谱柱（50mm×2.1mm，1.7μm），柱温35℃，流速0.25mL/min；进样量5μL；流动相为乙腈和10mmol/L的乙酸铵溶液（pH=3.5）（80/20，V/V），等度洗脱；

（3）质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子扫描模式；碰撞气（CAD）为8psi；气帘气（CUR）为20psi；雾化气（GS1）为45psi；辅助加热器（GS2）为60psi；喷雾电压（IS）为5500V；离子源温度（TEM）为150℃；

（4）标准曲线的绘制：取（1）所述的乌洛托品系列标准溶液，选择流动相为乙腈和乙酸铵，通过固相萃取柱以峰面积Y对浓度X（μg/L）作标准曲线；

（5）含油脂较高样品的前处理：将20g食品样品研磨成均匀的粉末或匀浆，准确称取2.00g于离心管中，加入5mL乙腈并置于超声萃取10min，以3000r/min离心5min，乙腈相过无水硫酸钠，转移至浓缩瓶浓缩近干后取乙腈层过固相萃取小柱，使用乙腈作为洗脱液，浓缩至1.0mL，待测；

（6）含油脂较低样品的前处理：将20g食品样品研磨成均匀的粉末或匀浆，准确称取2.00g于离心管中，加入5mL乙腈并置于超声萃取10min，以3000r/min离心5min，乙腈相过无水硫酸钠，转移至浓缩瓶浓缩近干后取乙腈层直接过0.22μm滤膜，待测；

（7）样品的测定：取上述（2）含油脂较高样品和（3）含油脂较低样品的洗脱液添加一系列浓度梯度的乌洛托品标准溶液，在上述（4）（5）的条件下进行UPLC-MS/MS测定，重复测定计算变异系数，测出样品中的乌洛托品的含量。

2.如权利要求1所述的一种使用UPLC-MS/MS检测食品中乌洛托品含量的方法，其特征在于：所述的步骤（1）中标准溶液的配置浓度为5、10、20、50μg/L。

3.如权利要求1所述的一种使用UPLC-MS/MS检测食品中乌洛托品含量的方法，其特征在于：所述的步骤（4）中使用的固相萃取柱为C18柱。

4.如权利要求1所述的一种使用UPLC-MS/MS检测食品中乌洛托品含量的方法，其特征在于：所述的步骤（5）中使用的固相萃取小柱为C18柱。

5.如权利要求1所述的一种使用UPLC-MS/MS检测食品中乌洛托品含量的方法，其特征在于：所述的步骤（6）（7）中判别含油脂含量的标准为目标样品的脂肪含量百分比限界为20%。