[发明专利]一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法有效
申请号: | 201410439069.4 | 申请日: | 2014-08-28 |
公开(公告)号: | CN104351047B | 公开(公告)日: | 2017-05-03 |
发明(设计)人: | 李俊;马鸣超;姜昕;关大伟;刘尧;曹凤明;陈慧君;沈德龙;杨小红;李力 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 促进 大豆 根瘤菌 竞争 根系 分泌物 制备 方法 | ||
1.一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法,包括下述步骤:
(1)、对大豆种子先用蒸馏水洗净,放入95%的酒精中浸泡1min,转至5%次氯酸纳溶液浸泡5min进行表面灭菌,然后用无菌水冲洗至少10次;
(2)、将经过表面灭菌的大豆种子在无菌条件下移至YMA琼脂表面皿中催芽,待种子发芽后,移至灭菌的浓度为30%的无氮Rigaud-Puppo营养液进行培养,在培养第12天收集大豆根系分泌物,即得高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物;其中培养条件为:白天30℃、16h光照,光照强度为960μmol·m-2·s-1;夜间15℃、8h黑暗。
2.根据权利要求1所述的一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法,其特征在于,YMA培养基组成为:甘露糖醇10.0g、K2HPO40.5g、MgSO4·7H2O0.2g、NaCl0.1g、酵母粉0.8g、CaCO31.5g、浓度为0.5%的刚果红5ml、琼脂15-20g、H2O1000ml;YMA培养基pH值为6.8~7.0。
3.根据权利要求1所述的一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法,其特征在于,无氮Rigaud-Puppo营养液中的成分为:CoCl2·6H2O0.004mg/L、H3BO32.86mg/L、MnCl2·4H2O1.81mg/L、ZnSO4·7H2O0.22mg/L、CuSO4·5H2O0.102mg/L、Na2MoO4·2H2O0.122mg/L、MgSO4·7H2O492.96mg/L、K2HPO4174.18mg/L、KH2PO4136.886mg/L、CaCl2·2H2O110.99mg/L和FeC6H5O7·5H2O5.62mg/L。
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