[发明专利]多色高危HPV荧光检测试剂盒

权利要求书

1.多色高危HPV荧光检测试剂盒，包括热启动Taq酶系统、通用引物、荧光探针、阴性对照和阳性对照，其特征在于：所述荧光探针为HPV特异性MGB探针，HPV特异性MGB探针的序列如下：

探针1  TTGGCATAATCAATTATTT

探针2  TGGGGCAATCAGTTRTTTGT

探针3  CTGATTGTTCCARCARATG

探针4  AATCAGTTGTTTGTTACTGT

探针5  TTTRTTACCTGTGTTGATAC

探针6  TAACTGTTGTGGATACCAC

探针7  TATATGTTGGCACAATCAA

探针8  TGGTTACCCCAACAAATG

探针9  TAATTGATTATGCCAGCAAACA

探针10 TTACCTGTGTTGATACYAC

探针11 CTGATTGCCCCAACAAAT

探针12 TATWTGTTGGCATAATCAATTA

探针13 ACAAAYAACTGATTGCCCCA

探针14 ACTACAGTAACAAAYAATTG

探针15 ACAAACAACTGATTATGCCAAC

探针16 CTCATTTGGCTACTGTAAATGCAGACAC

探针17 TTCAGGATACTGCCCCGGACAGTAGG

探针18 CTCCTAAATACATTGCTGGACAAAATAC；

上述探针的3’端连接有MGB，5’端连接有荧光基团。

2.根据权利要求1所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述通用引物为：

引物1 GCMCAGGGWCATAAYAATGG

引物2 GCTCAGGGTTTAAACAATGG

引物3 GCCCAGGGCCACAATAATGG

引物4 GCNCAGGGNCACAATAATGG

引物5 GCNCAGGGNCATAACAATGG

引物6 GCNCAGGGNCATAATAATGG

引物7 CGTCCMARRGGAWACTGATC

引物8 TGAAAAATAAACTGTAAATCATATTC

引物9 CCTATTCTTCACCATGCCTTA

引物10 TGGTATTGATATTATGAATGTATGAC；

引物中的N指肌苷。

3.根据权利要求1或2所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒设有内标引物及内标探针，内标引物如下：

引物11 CAACTTCATCCACGTTCACC

引物12 GAAGAGCCAAGGACAGGTAC 

内标探针的序列如下：

探针19 TCTCCCTGCAGAGGGTTAAGGCGC。

4.根据权利要求1或2所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述热启动Taq酶系统中添加有UDG酶。

5.根据权利要求1或2所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还设有DNA提取液，DNA提取液的组成为EDTA的浓度为0.25mol/L、乙酸钠的浓度为25mmol/L和DTT的浓度为1mmol/L。

6.根据权利要求4所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述热启动Taq酶系统含有经过化学修饰的热启动Taq酶、dNTPs和UDG酶，其中每人份体系中热启动Taq酶为5U，dNTPs为0.2mmol/L，UDG酶为0.3U。

7.根据权利要求1、2或6所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述多色高危HPV荧光检测试剂盒为三色高危HPV荧光检测试剂盒，其探针16～18连接的荧光基团不同于探针1～15连接的荧光基团。

8.根据权利要求1、2或6所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：所述多色高危HPV荧光检测试剂盒为四色高危HPV荧光检测试剂盒，其探针1～2连接的荧光基团不同于探针3～18连接的荧光基团。

9.根据权利要求3所述的多色高危HPV荧光检测试剂盒，其特征在于：内标探针连接的荧光基团不同于探针1～18连接的荧光基团。