[发明专利]一种测定大豆对草甘膦耐性的方法及应用

权利要求书

1.一种测定大豆对草甘膦耐性时向待测大豆植株施用草甘膦的方法，包括如下步骤：取种子萌发出土后得待测大豆植株，将草甘膦原液或稀释液滴加于所述待测大豆植株的绿色组织。

2.一种测定大豆对草甘膦半抑制浓度的方法，包括如下步骤：

(1)用无菌水将草甘膦溶液的原液按照10倍比梯度稀释，得到4个稀释倍数的草甘膦溶液：10倍，100倍，1000倍，以及10000倍；所述草甘膦溶液的原液的稀释倍数记为1倍；

(2)取种子萌发出土后的待测大豆植株，分为实验组和对照组，分别按照如下进行点施处理：

实验组：取步骤(1)中制备的不同稀释倍数的草甘膦溶液1μl，分别滴加于所述待测大豆植株的同一绿色组织；

对照组：将1μl无菌水替代所述实验处理组中的所述不同稀释倍数的草甘膦溶液，其余同所述实验处理组；

(3)在步骤(2)点施处理后，当所述对照组中的所述待测大豆植株生长到第一个三出复叶展开时，测量所述实验组中经所述不同稀释倍数的草甘膦溶液处理的所述待测大豆植株的株高，以及所述对照组中所述待测大豆植株的株高；

用所述实验组的所述株高比上所述对照组的所述株高，所得比值记为相对株高；

(4)根据所述草甘膦溶液的不同稀释倍数的对数值与步骤(3)获得的对应的所述相对株高，绘制线性回归曲线，得到线性回归方程；

(5)根据步骤(4)所得的线性回归方程，计算当所述相对株高为0.5时，对应的所述草甘膦溶液的稀释倍数的对数值，进而计算得到相应的所述草甘膦溶液的稀释倍数，即为半抑制浓度。

3.权利要求2所述方法在比较不同大豆品种对草甘膦耐性高低中的应用。

4.比较不同大豆品种对草甘膦耐性高低的方法，包括如下步骤：

(I)采用权利要求2所述方法分别测定所述不同大豆品种对草甘膦的半抑制浓度；

(II)根据步骤(I)的测定结果确定所述不同大豆品种对草甘膦耐性的高低：所述半抑制浓度越大，对应的所述大豆品种对草甘膦的耐性越低；所述半抑制浓度越小，对应的所述大豆品种对草甘膦的耐性越高。

5.一种利用从转入抗草甘膦基因的转基因大豆群体中获得对草甘膦相对高抗的转基因大豆个体的方法，包括如下步骤：

(a1)采用权利要求2所述方法测定转基因受体亲本大豆对草甘膦的半抑制浓度；

(a2)用无菌水将权利要求2中的所述草甘膦溶液的原液进行步骤(a1)中所得的半抑制浓度对应稀释倍数的稀释，得到稀释液；

(a3)取种子萌发出土后的向所述转基因受体亲本大豆中转入抗草甘膦基因的转基因大豆群体和所述转基因受体亲本大豆，分为实验组和对照组，分别按照如下进行点施处理：

实验组：将1μl步骤(a2)配制的稀释液滴加到所述转入抗草甘膦基因的转基因大豆群体的每个植株的同一绿色组织；

对照组：将1μl无菌水滴加到所述转基因受体亲本大豆的所述同一绿色组织；

(a4)在步骤(a3)点施处理后，当所述对照组中的所述转基因受体亲本大豆的真叶展开时，观察所述实验组中的所述转入抗草甘膦基因的转基因大豆的表型，以及所述对照组中的所述转基因受体亲本大豆的表型，根据表型观察结果按照如下从所述转入抗草甘膦基因的转基因大豆群体中获得对草甘膦相对高抗的转基因大豆个体：选取所述实验组中符合如下条件A的所述转入抗草甘膦基因的转基因大豆个体，即为所述对草甘膦相对高抗的转基因大豆个体；

所述条件A为：与所述对照组中的所述转基因受体亲本大豆表型无差异。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述绿色组织为下胚轴、子叶、缩于子叶中间的未展开的生长点、真叶或三出复叶。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述滴加的位置为所述下胚轴的钩状弯曲的外侧。

8.权利要求2所述的方法在确定大豆对草甘膦的安全使用剂量中的应用。

9.权利要求2所述的方法在测定子叶出土型植物对于借助绿色组织杀灭杂草的除草剂的耐性中的应用。