[发明专利]检测血液中微生物的方法

权利要求书

1.检测血液中微生物的方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：

(1)将2,3,5-三苯基氯化四氮唑与血培养基加入血培养瓶，再加入35-40mL血培养基及2-4g树脂粒，所述2,3,5-三苯基氯化四氮唑在血培养基及树脂粒混合物中浓度为0.01-0.03g/mL；或

2,3,5-三苯基氯化四氮唑混合到硅橡胶富氧膜中，制备成固体指示剂，并固定在血培养瓶底部，再加入35-40mL血培养基及2-4g树脂粒；所述2,3,5-三苯基氯化四氮唑在硅橡胶富氧膜中浓度为0.01-0.03g/mL；

(2)血培养瓶于121℃，灭菌20min；

(3)向血培养瓶中加入血液样品，在34-36℃条件下培养0-5天；

(4)检测血培养瓶中指示带的光反射强度，绘制光反射强度曲线，根据光反射强度曲线确定微生物生长结果。

2.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，步骤(1)硅橡胶富氧膜为：23-27mL的聚二甲基硅氧烷、730-770μL正桂酸乙酯、90-110μL二月桂酸二丁基锡和1-1.5mL环己烷的混合物。

3.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(1)2,3,5-三苯基氯化四氮唑先用等质量的单蒸水溶解。

4.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(2)血培养基选自肉汤培养基、大豆酪蛋白培养基或胰酪胨大豆肉汤培养基。

5.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(2)的树脂粒选自0.2-0.8mm的阳离子交换树脂粒或非离子吸附树脂粒。

6.根据权利要求5述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(2)所述阳离子交换树脂粒选自732阳离子交换树脂粒、强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、超强性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔强碱性季铵型阳离子交换树脂；非离子吸附树脂粒选自聚苯乙烯型吸附树脂、Amberlite XAD-4非离子型大孔树脂。

7.据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(4)将2,3,5-三苯基氯化四氮唑直接加入血培养瓶中的培养样品检测时的光波为590nm/750nm双波长。

8.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(4)将2,3,5-三苯基氯化四氮唑混合到硅橡胶富氧膜培养的样品检测时的光波为570-610nm波长。

9.根据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(4)所述的指示带为：将2,3,5-三苯基氯化四氮唑直接加入培养基的血培养瓶，是指距离培养基表层2-3cm处的培养基。

10.据权利要求1所述检测血液中微生物的方法，其特征在于，所述步骤(4)所述的指示带为：将2,3,5-三苯基氯化四氮唑混合到硅橡胶富氧膜，再加入培养基的血培养瓶是指培养瓶底部的硅橡胶富氧膜。