[发明专利]一种基于山奈酚3,4’-双-O-β-D-葡萄糖苷含量鉴别蜂花粉的方法

权利要求书

1.一种基于山奈酚3,4’-双-O-β-D-葡萄糖苷含量鉴别蜂花粉的 方法，包括以下步骤：标准工作液的配制、蜂花粉的前处理方法和液 相色谱-串联质谱法检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蜂花粉的前 处理方法为加速溶剂萃取法，具体包括以下步骤：蜂花粉用浓度为 65-70％的甲醇溶液萃取，循环提取2次。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述蜂花粉的前 处理方法包括以下步骤：蜂花粉用65-70％的甲醇溶液萃取，萃取压 力为8.0-9.5MPa，萃取温度为130-135℃，萃取时间为15-20min， 循环提取2次。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蜂花粉的前 处理方法包括以下步骤：称取粉碎后粒径均匀的蜂花粉用其重量2-6 倍体积的65-70％甲醇萃取，萃取压力为8.0-9.5MPa，萃取温度为 130-135℃，萃取时间为15-20min，循环提取2次。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述蜂花粉的粒 径为100-150μm。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述甲醇的用量 为蜂花粉重量的2.3-5.7倍量体积。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于,所述液相色谱-串 联质谱条件的条件为：流动相为0.1％的甲酸和乙腈溶液；C18色谱 柱，柱温为30℃；流速为0.2mL/min；进样量为5.0μL；洗脱条件 见表1；雾化器温度：350℃，雾化器流速：6L/min，雾化器压力 35psi，毛细管电压:3500V，鞘流气温度:350℃，鞘流气流速:9 L/min，锥孔电压:1000V。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述液相色谱-串 联质谱条件的条件中的洗脱梯度表为：

时间(分钟) A相(0.1％甲酸溶液) B相(乙腈) 0 90 10 1.0 90 10 6.0 78 22 9.0 78 22 9.10 90 10 15.0 90 10