[发明专利]复合微生态制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合微生态制剂及其制备方法，具体地说是一种降低养殖水体污染的复合微生态制剂及其制备方法。

背景技术

随着水产养殖业迅猛发展，养殖密度、集约化养殖程度均不断提高，养殖水质污染成为阻碍这一领域发展的一大难题。微生态制剂对与水质污染的优势，逐渐受到人们的重视。

从目前来看，现有的微生态制剂虽然品种多，但产品质量参差不齐，而且菌种单一，应用范围不够广泛，水体中的氨氮和亚硝酸盐的含量不能够明显得到降低，对养殖动物有很大的毒害作用。

发明内容

本发明就是为了解决现有降低养殖水体污染的微生态制剂菌种单一、不能明显降低水体中氨氮和亚硝酸盐的含量的技术问题，提供一种菌种多样、能够明显降低水体中氨氮和亚硝酸盐的含量的降低养殖水体污染的复合微生态制剂及其制备方法。

本发明提供一种复合微生态制剂，其含有粪链球菌活菌数为1×10⁹个/ml～5×10⁹个/ml；酿酒酵母活菌数为2×10⁸个/ml～1×10⁹个/ml；枯草芽孢杆菌活菌数为1×10⁹个/ml～5×10⁹个/ml；地衣芽孢杆菌活菌数为1×10⁹个/ml～5×10⁹个/ml。

本发明还提供一种复合微生态制剂的制备方法，其步骤如下：

(1)制备粪链球菌和酿酒酵母的混合培养液，所使用的培养基含有以下重量百分比的成分：葡萄糖1.2％～2.0％、玉米浆粉1.2％～2.0％、酵母蛋白0.5％～1.0％、大豆粉0.2％～0.6％、玉米面0.1％～0.3％、磷酸氢二钾0.1％～0.5％、氯化钠0.02％～0.1％、硫酸镁0.01％～0.02％、硫酸铵0.01％～0.05％，其余为水，pH＝6.5～7.5；

(2)制备枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌的混合培养液，所使用的培养基含有以下重量百分比的成分：葡萄糖0.8％～1.5％、玉米浆粉0.5～1.0％、酵母蛋白0.3％～0.6％、大豆粉0.1％～0.3％、玉米面0.1％～0.3％、磷酸氢二钾0.02％～0.1％、硫酸镁0.01％～0.02％、硫酸铵0.01％～0.05％，硫酸锰0.005％～0.008％，其余为水，pH＝7.0～7.5；

(3)将活菌数为2×10⁹个/ml～1×10¹⁰个/ml的粪链球菌与活菌数为4×10⁸个/ml～2×10⁹个/ml的酿酒酵母的混合培养液按体积份数5～7份，和活菌数为1×10⁹个/ml～2×10¹⁰个/ml的枯草芽孢杆菌与活菌数为1×10⁹个/ml～2×10¹⁰个/ml的地衣芽孢杆菌的混合培养液按体积份数3～5份，进行配制,从而得到复合微生态制剂。

优选地，步骤(1)中粪链球菌和酿酒酵母的混合培养液的制备过程如下：

a.将粪链球菌和酿酒酵母的斜面分别在无菌环境下接种于1000ml摇瓶的灭菌培养基中，培养基装量为300ml，摇床培养条件为：温度28～33℃、转数200～220rpm，培养10～18小时，得到活菌数为2×10⁹个/ml～1×10¹⁰个/ml的粪链球菌，和活菌数为4×10⁸个/ml～2×10⁹个/ml的酿酒酵母，为一级发酵罐所用的种子液，所述粪链球菌和酿酒酵母的接种量均为培养基体积的1％；

b.将步骤a培养的种子液分别接种于100L一级种子发酵罐的灭菌培养基中，培养基装量为70L，接菌量为培养基体积的5～10％，发酵条件为：温度28～33℃、培养基与所通空气的体积比为1：0.7～1.1、搅拌转数为180～240rpm，发酵培养8～16小时，得到二级发酵罐所用种子菌液；

c.将步骤b所得的粪链球菌的种子菌液接种到二级发酵罐中，培养8～10小时后，再将步骤b所得的酿酒酵母的种子菌液接到该二级发酵罐中与粪链球菌混合培养24～36小时，得到粪链球菌和酿酒酵母混合培养液。

优选地，步骤c中发酵条件为：温度28～33℃；培养基与所通空气的体积比为1:0.7～1.1；搅拌转数为180～240rpm。

优选地，步骤(2)中枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌的混合培养液的制备过程如下：