[发明专利]薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法

权利要求书

1.薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征在于，以肉桂醛、磷酸混合液做荧光衍生剂，以甲基叔丁基醚、石油醚、甲醇混合液为流动相展开剂，薄层色谱板为固定相，经薄层展开的氨基甲酸乙酯与荧光衍生剂反应后，在紫外分析仪可肉眼观察到绿色的氨基甲酸乙酯荧光斑点，Rf值固定；具体步骤为：

（1）取出薄层硅胶板于105℃~110℃烘箱内活化半小时，放入干燥器中备用；

（2）配制展开剂，搅拌后倒入双槽薄层色谱展开缸中，静置0.5~1小时，使之饱和；

（3）配制荧光衍生剂溶液：将肉桂醛，丙酮，磷酸混合，搅拌后备用；

（4）在距薄层硅胶板下端1cm处点样，于同一侧面上距薄层硅胶板上端2cm处铅笔标记作为展开前沿线，点样样品为至少含有50ng的氨基甲酸乙酯待测液；

（5）在薄层展开缸中展开，展开剂到达展开前沿线后取出，晾干；

（6）将晾干后的薄层板浸于荧光衍生剂中后取出，之后再在烘箱反应5—20分钟；

（7）在紫外分析仪于365nm处暗环境条件下观察薄层板，此时薄层板背景颜色为蓝白色，若在点有氨基甲酸乙酯的展据范围内有清晰的绿色斑点，此斑点即是氨基甲酸乙酯衍生后的荧光斑点，若点样量中含有的氨基甲酸乙酯含量小于50ng时，斑点不可见。

2.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，所述步骤（1）中，所述薄层硅胶板为青岛海洋薄层硅胶板，其规格为G或GF，5cm×10cm或10cm×10cm。

3.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（2）中所述展开剂的组成为甲基叔丁基醚、石油醚（高沸程）和甲醇；其体积比为甲基叔丁基醚：石油醚（高沸程）：甲醇=（3—6）:（3—10）:（1—5）。

4.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（2）中所述展开剂的组成为甲基叔丁基醚、石油醚（高沸程）和甲醇；其体积比为甲基叔丁基醚：石油醚（高沸程）：甲醇==（4—6）：（5—7）：（2—4）。

5.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（3）中所述荧光显色剂用量分别为，肉桂醛20μL—1mL，丙酮10—80ml，磷酸0.1—10ml。

6.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（3）中所述荧光显色剂用量分别为，肉桂醛为60—200μL，丙酮为30—50mL，磷酸为2—5ml。

7.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（4）中所述样品中的氨基甲酸乙酯含量在薄层硅胶板上的点样量至少为50ng。

8.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（6）中所述浸于荧光衍生剂中时间为1~20秒钟，反应为在烘箱80—150℃反应5—20分钟。

9.根据权利要求1所述的薄层色谱法半定量测定氨基甲酸乙酯的方法，其特征是，步骤（6）中所述浸于荧光衍生剂中时间为1~3秒钟，反应为在烘箱100—140℃反应5—12分钟。