[发明专利]一种食用香精香料中八种成分同时测定的方法

权利要求书

1.一种食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于包括以下步骤：

A、萃取溶液的配制：取甲醇制备成体积比7:3的甲醇-水溶液即为萃取溶液；

B、标准溶液的配制：用含内标的萃取溶液分别配制硫脲、芝麻酚、脱氢乙酸、对乙氧基苯脲、邻氨基苯甲酸肉桂酯、正二氢愈创酸、马兜铃酸A和山梨酸的标准溶液；

C、样品溶液的制备：使用含内标的萃取溶液萃取食用香精香料样品，过有机相滤膜后得到样品溶液；

D、超高效液相色谱-串联质谱仪分析：利用超高效液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；

E、食用香精香料中八种成分硫脲、芝麻酚、脱氢乙酸、对乙氧基苯脲、邻氨基苯甲酸肉桂酯、正二氢愈创酸、马兜铃酸A和山梨酸含量的计算。

2.根据权利要求1所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于B步骤中所述标准溶液的配制是：分别称取硫脲、芝麻酚、脱氢乙酸、对乙氧基苯脲、邻氨基苯甲酸肉桂酯、正二氢愈创酸、马兜铃酸A和山梨酸各20mg，用甲醇溶解后转移至100mL棕色容量瓶中，定容至刻度，分别得到单一标准储备液；称取水杨酸-d4 10mg，用甲醇溶解后转移至50mL棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到内标储备液；分别取单一标准储备液0.1-1mL至50mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到一级混合标准溶液；取内标储备液1mL至50mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到一级内标标准溶液；分别准确移取0.1mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL的一级混合标准溶液至50mL棕色容量瓶中，每个棕色容量瓶均加入2mL一级内标标准溶液，用萃取溶液定容至刻度，得到系列标准溶液。

3.根据权利要求1所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于取0.8mL内标储备液至1L棕色容量瓶中，用萃取溶液定容至刻度，得到含内标的萃取溶液。

4.根据权利要求1或3所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于所述含内标的萃取溶液中的内标物为水杨酸-d4。

5.根据权利要求1所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于C步骤中所述样品溶液的制备方法是：称取0.5g试样于50mL具塞锥形瓶中，准确加入25mL含内标的萃取溶液，用150r/min振荡萃取20min，取上清液过有机相滤膜，滤液为样品溶液。

6.根据权利要求1或5所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于所述的有机相滤膜为0.22μm聚醚砜滤膜。

7. 根据权利要求1所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于D步骤中所述的液相色谱分析条件为：色谱柱采用C18，1.7μm，2.1×100mm色谱柱；流动相为甲醇A和0.05%甲酸水溶液B；流速：0.4mL/min；进样量：5μL；柱温：40℃；样品温度：10℃；采用梯度洗脱程序，即初始A是10%，B是90%，1min时A是35%，B是65%，4min时A是65%，B是35%，6min时初始A是90%，B是10%，7min时A是90%，B是10%，8min时A是10%，B是90%，10min时A是10%，B是90%；所述的质谱条件为采用电喷雾离子源（ESI）正离子模式，扫描方式为多反应监测模式，电喷雾电压为5500V，离子源温度600℃，气帘气：25Psi，雾化气：55Psi，辅助加热气：50Psi，硫脲、芝麻酚、脱氢乙酸、对乙氧基苯脲、邻氨基苯甲酸肉桂酯、正二氢愈创酸、马兜铃酸A、山梨酸和水杨酸-d4的定量离子对分别为：m/z 60.0,109.1,127.1,108.0,117.1,193.2,265.1,95.1，97.1。

8.根据权利要求1所述食用香精香料中八种成分同时测定的方法，其特征在于E步骤中所述含量的计算是：首先以标准溶液所检测出的目标物和内标物的色谱峰面积比对应其相应浓度比进行回归分析得到标准曲线线性方程，然后将样品溶液检出的目标物的色谱峰面积，代入标准曲线线性方程，即得到样品中硫脲、芝麻酚、脱氢乙酸、对乙氧基苯脲、邻氨基苯甲酸肉桂酯、正二氢愈创酸、马兜铃酸A、山梨酸的含量。