[发明专利]乙型肝炎病毒表面抗原定量测定试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种免疫诊断技术，具体地说是一种磁微粒作为载体的乙型肝炎病毒表面抗原定量测定试剂盒及其制备方法。

背景技术

我国是个肝炎大国，发病人数众多，仅乙型肝炎病毒感染者就达1.2亿。约占我国总人口的10%，乙型肝炎病程迁延，如得不到及时有效的治疗，将会发展为肝硬化甚至肝癌，即人们通常所说的“乙肝发展三部曲”。有资料显示，全球每年有100万人因感染乙肝病毒而死亡，占全球疾病死亡原因的第九位，可见乙型肝炎是严重危害人类健康的疾病之一。

乙型肝炎病毒传播途径：1.经血液传播：主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为，纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。2.母婴传播：指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿的一种方式。表面抗原（HBsAg）阳性的母亲有40%－50%将乙肝病毒传播给婴儿，表面抗原（HBsAg）和e抗原（HBeAg）双阳性的母亲有90%－100%将乙肝病毒传播给婴儿。3.性接触传播：男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。4.密切接触传播：家庭日常生活可造成传播的情况主要有：HBsAg阳性人的创伤出血、月经血、痔疮血污染家庭环境；与HBsAg阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀；HBsAg阳性人同乳幼儿密切接触，尤其是口喂小儿。

感染乙肝病毒后，HBsAg为首先出现的病毒标志物。从感染到血中出现HBsAg的时间间隔，与接种和感染的途径及其数量有关：如果数量大，则时间间隔短，约3周，如输入HBsAg阳性的血液，可在接种后6天检测到HBsAg；如果数量小，则间隔时间长，可达4个月，甚至在6个月以上。 一般在HBsAg出现后7周出现肝炎症状和肝功能异常，此时常常为HBsAg滴度达高峰时间。有人认为症状和肝功能异常出现的早迟和感染途径有关：经血感染65天，经口感染者98天，在血液中出现HBsAg。在自限性感染时，大多数病人的HBsAg在血中持续时间为6周，最长达20周，一般在肝炎症状出现后4周内大多消失。通常在患者血清转氨酶达高峰后12周消失，如超过6个月仍不消失，患者可能变为慢性肝炎及慢性乙肝病毒携带者。 

HBsAg无症状携带者的HBsAg持续存在血中可达数年、数十年，甚至终生。虽然无症状和体征，肝功也大多正常，但肝组织都有不同程度的损伤。因此，临床上将其视为乙肝病毒感染的一种隐匿过程，作为携带者本人及医师均不能完全忽视，要每半年至1年定期复查乙肝两对半、HBV-DNA及肝功能，随时了解各种化验检查的动态变化。

乙型肝炎病毒表面抗原的检测方法目前常用有酶联免疫法、胶体金法、化学发光法；酶联免疫法(ELISA)作为定性检测的方法，其灵敏度、特异性均较好，且经济实惠、所以是应用得最广、最多的方法。胶体金法的最突出优点是快速，及时、提高了检测的速度。不需要贵重仪器，但其特异性和灵敏度较酶联免疫法差，更适合于现场应用。化学发光法可定量检测出体内乙肝病毒感染的数量，其灵敏度高，从方法学角度和自动化程度看，化学发光法优于酶联免疫法。这些方法虽然具有很多优点，但在检测的灵敏度、特异性、稳定性等方面还有待进一步提高。全自动微粒子化学发光免疫分析是在酶免疫分析基础上结合了高灵敏度的化学发光测定技术和磁性微粒分离技术，与其他方法相比，这种方法有许多独特的优点，首先它用顺磁性微粒作为固相载体，由于颗粒体积小，表面积大，扩大了反应面积，大大提高了检测灵敏度；其次由于使用全自动仪器及配套试剂，使人为因素减至最低，提高了方法的稳定性和结果的重复性，同时也使得批内差异与批间差异都较小。与放射免疫法相比，微粒子化学发光法除具有高灵敏度、高精确度、高可靠性等优点外，还具有如下优点：a.无放射性污染，稳定性好；b.特异性高；c.试剂可随用随取，测定方便迅速，可作为急诊检测项目。根据大量的实验结果以及临床应用资料，从实用性、稳定性、准确性及其发展前景来看，该方法逐渐成为取代放射性免疫分析和酶免疫分析的首选。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种具有高灵敏度和特异性，适合于临床乙型肝炎病毒的辅助诊断的微粒子化学发光法表面抗原定量测定试剂盒及其制备方法。