[发明专利]一种全营养微生物生防有机肥的制备方法与应用

权利要求书

1.一种全营养微生物生防有机肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN-9接种于PDA平板培养基上进行平板培养；

(2)将步骤(1)平板培养后的拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN-9菌丝块转接至PDB培养基中，进行PDB液体培养，制得液体培养液；

(3)将步骤(2)制得的液体培养液按体积比为1:(1～3)接种于麸皮葡萄糖培养基中，经发酵培养，制得发酵液；

上述麸皮葡萄糖培养基每升组分如下：

麸皮50～70克，葡萄糖20克，琼脂18-20克，水定容至1L；

(4)将农家肥原料干料粉碎后，按干重的30～50wt％加水，混合均匀，然后按农家肥原料干料的干重的1.5～5wt％接种步骤(3)制得的发酵液，混合均匀，经堆料发酵3～5天，制得拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN-9的孢子数之和不小于0.5亿/克的发酵料；

(5)按步骤(4)制得的发酵料质量的0.02％～0.05％加入甲壳素、7.0％～8.0％加入尿素、0.5％～1.5％加入硫酸钙(CaSO₄)、5.0％～12.0％加入三水合磷酸氢二钾(K₂HPO₄·3H₂O)、1.0％～5.0％加入凹凸棒土，混合均匀，然后按步骤(4)制得的发酵料质量的1％～5％加入甲基纤维素、1％～5％加入羧甲基纤维素钠、1％～5％加入乙基纤维素，混合均匀，制得全营养微生物生防有机肥；

所述步骤(1)中的拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，菌种保藏编号CGMCC NO.1443；

黑根霉(Rhizopus nigricans)RN-9于2013年11月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号CGMCC NO.8436，保藏地址：北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的培养条件为在25℃～30℃培养36h～60h。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的菌丝块为用内径为5mm的打孔器在菌落边缘打孔后，用接种环挑取获得。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的液体培养条件为在25℃～30℃、100～150rpm条件下，培养8～15天。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，液体培养条件为在28℃、120rpm条件下，培养10天。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的发酵培养条件为在25℃～30℃、100～150rpm条件下，培养3～5天。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，发酵培养条件为在28℃、120rpm条件下，培养4天。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的农家肥原料为作物秸秆、树叶、杂草。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的粉碎为粉碎至长度1～3cm。

10.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的堆料发酵为：将堆料堆成截面为宽1.5～2.5m、高0.8～1.2m的条形堆，每天翻堆3～4次。