[发明专利]烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6及其干扰表达载体和应用有效
申请号: | 201410316861.0 | 申请日: | 2014-07-04 |
公开(公告)号: | CN104086637B | 公开(公告)日: | 2017-04-19 |
发明(设计)人: | 王根洪;夏庆友;谢小东;高军平;熊海军 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;C12N15/66;A01H5/00 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 烟草 独脚金 内酯 转运 蛋白 ntpdr6 及其 干扰 表达 载体 应用 | ||
1.干扰烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6表达的转基因干扰表达载体,所述烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.干扰烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6表达的转基因干扰表达载体,其特征在于:所述干扰表达载体为含有干扰SEQ ID NO.3所示序列表达的发夹结构经NotⅠ酶切位点连入pART27植物表达载体而得。
3.根据权利要求2所述的干扰表达载体,其特征在于:所述发夹结构如SEQ ID NO.9所示。
4.权利要求1-3任一项所述干扰表达载体的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:以SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示序列为引物,烟草的根组织cDNA为模板进行PCR扩增获得正向序列,将正向序列通过XhoI和KpnI酶切位点连入pHANNIBAL载体,获得含有正向序列的pHANNIBAL载体;然后以SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示序列为引物,烟草的根组织cDNA为模板进行PCR扩增获得反向序列,将获得的反向序列通过XbaI和HindIII连入含有正向序列的pHANNIBAL载体,获得含有正向序列和反向序列的pHANNIBAL载体,再利用NotⅠ酶切位点从含有正向序列和反向序列的pHANNIBAL载体切下发夹结构序列并连入经NotⅠ酶切、去磷酸化的pART27植物表达载体中,即得干扰表达载体。
5.权利要求1-3任一项所述干扰表达载体在促进烟草侧枝、腋芽或侧芽增长中的应用。
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