[发明专利]一种利用木糖产聚羟基烷酸酯菌群的筛选和驯化方法

权利要求书

1.一种利用木糖产聚羟基烷酸酯菌群的筛选和驯化方法，其特征是：以富含混合菌群的活性污泥为原料，利用混合菌群产PHA的饱食饥饿驯化模式进行驯化，驯化过程中取样，使用尼罗蓝染色法进行PHA合成菌群的筛选；筛选得到的PHA高产菌群富集培养后回注到正在驯化中的体系中，对驯化中的菌群进行扰动；驯化结束后使用得到的混菌体系进行PHA发酵生产，发酵结束后进行PHA提取。

2.如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是所述的饱食饥饿驯化模式是包括进料、通气，沉降和排水四个步骤为一个培养周期。

3.权如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是所述的尼罗蓝筛选方法是取浓度梯度的细胞悬液均匀涂布到筛选培养基平板上，黑暗培养后置于365nm紫外光下照射，选择荧光颗粒多的平板洗板，富集培养后接种到驯化体系中。

4.权如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是驯化培养基为：木糖1800mg/L，氯化铵170mg/L，磷酸氢二钾90mg/L，磷酸二氢钾35mg/L，硫酸镁600mg/L，EDTA100mg/L，氯化钙70mg/L，微量元素2mL/L，其中微量元素组成为：六水氯化铁1000mg/L，硼酸150mg/L，六水氯化钴150mg/L，四水氯化锰120mg/L，七水硫酸锌120mg/L，二水钼酸钠60mg/L，五水硫酸铜30mg/L，碘化钾30mg/L；pH6.6～6.7。

5.权如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是筛选培养基：蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化钠2g/L，尼罗蓝终浓度50mg/L，琼脂20g/L；pH7.5。

6.权如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是发酵培养基：木糖20g/L，氯化铵2g/L，磷酸氢二钾3.3g/L，硫酸镁1.2g/L，微量元素10mL/L；pH8。

7.权如权利要求1所述筛选和驯化方法，其特征是获得的混菌体系中主要优势菌株为γ-Proteobacteria、Cellvibrio sp.、Uncultured bacterium和Pseudomonas putida。