[发明专利]利用海洋真菌生产免疫抑制化合物的方法及其培养基

权利要求书

1.一种用于发酵培养海洋真菌生产免疫抑制化合物的培养基，其特征在于，所述培养基的组成成分为每升蒸馏水中包含有：葡萄糖11.6-28.4g/L、尿素0.87-2.13g/L、麦芽浸膏17.39-42.61g/L、磷酸二氢钾0.4-0.6g/L、七水硫酸镁0.4-0.6g/L、氯化铁0.004-0.006g/L。

2.根据权利要求1所述的用于发酵培养海洋真菌生产免疫抑制化合物的培养基，其特征在于，所述培养基的组成成分为每升蒸馏水中包含有：葡萄糖22.98g/L、尿素1.48g/L、麦芽浸膏37.5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、七水硫酸镁0.5g/L、氯化铁0.005g/L。

3.一种用于发酵培养海洋真菌生产免疫抑制化合物的培养基之制备方法，其特征在于，该制备方法的步骤为：

将葡萄糖、尿素、麦芽浸膏、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、氯化铁加入蒸馏水中定容至1L，使上述成分在培养基中的终浓度分别为11.6-28.4g/L、0.87-2.13g/L、17.39-42.61g/L、0.4-0.6g/L、0.4-0.6g/L、0.004-0.006g/L，再以NaOH调节pH值至6.5-7.0，然后在121℃下灭菌15-30 分钟，灭菌后即得海洋真菌生产免疫抑制化合物的培养基。

4.一种利用海洋真菌生产免疫抑制化合物的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a.将冷冻保存的海洋印尼红藻共生真菌Daldinia eschscholzii解冻后，在固体平板培养基中央进行点样并活化培养7-10天，获得新鲜固体平板培养基，固体平板培养基每隔30天重新活化一次；

b.从新鲜的海洋印尼红藻共生真菌Daldinia eschscholzii的固体平板培养基中挖取1块琼脂块，接种至种子培养基中发酵培养3-4天，获得新鲜种子液；

c.取所述新鲜种子液，按5-20% (v/v)的接种量接入权利要求1和2任一项所述培养基，以28±2°C、180±20 rpm摇床振荡培养6-8天后，获得发酵液；以及

d.取所述发酵液进行抽提、萃取、纯化，获得免疫抑制化合物Dalesconol A和Dalesconol B。

5.根据权利要求4所述的利用海洋真菌生产免疫抑制化合物的方法，其特征在于，所述海洋印尼红藻共生真菌Daldinia eschscholzii是一种光轮层炭壳菌。