[发明专利]基于微流控芯片和蛋白质芯片检测血清过敏原特异性的IgE的方法有效
| 申请号: | 201410271147.4 | 申请日: | 2014-06-17 |
| 公开(公告)号: | CN105223367B | 公开(公告)日: | 2018-01-16 |
| 发明(设计)人: | 隋国栋;程训佳;郑璐璐;付永锋;冯萌;荆雯雯 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
| 主分类号: | G01N35/00 | 分类号: | G01N35/00;G01N33/96 |
| 代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
| 地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 基于 微流控 芯片 蛋白质 检测 血清 过敏原 特异性 ige 方法 | ||
1.一种基于微流控芯片和蛋白质芯片的血清中过敏原特异性的IgE检测方法,其特征在于,其包括步骤:
(1)用蛋白质点样机将过敏原蛋白点在固相载体上制成蛋白质芯片;
(2)将蛋白质芯片和微流控芯片键合,其中:微流控芯片由多连反应腔室组成,微流控芯片和蛋白质芯片键合时,反应腔室覆盖在蛋白质芯片的点样区域上面,使进入反应腔室的血清和抗体与蛋白质芯片上面固定的过敏原反应;
(3)将含有3%BSA的PBS缓冲液泵入微流控芯片反应腔室;
(4)稀释的血清泵入微流控反应腔室,血清中的特异性IgE与固定在蛋白质芯片上的过敏原蛋白结合;
(5)将抗人的IgE抗体泵入反应腔室后,再泵入带荧光的抗体与抗人的IgE抗体反应;
(6)PBS洗涤后将微流控芯片和蛋白质芯片分离,单独将蛋白质芯片放到芯片扫描仪上采集荧光信号,采用软件分析血清中IgE含量。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述步骤(1)中,固相载体的制材选自硅片类材料,玻璃材料,塑料材料或纤维素材料。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,固相载体上点样的过敏原蛋白选自天然过敏原蛋白或重组过敏原蛋白。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,固相载体所点过敏原蛋白点为一种过敏原蛋白,或为多种过敏原蛋白组合。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,固相载体上所点蛋白点为单个,或为多个。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,由蛋白质芯片和微流控芯片键合的芯片中的反应腔室,每个腔室设有多个进样口和出样口。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的微流控芯片中的分析室独立或者连接使用。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法通过包括硬件部分和软件系统的检测系统进行;硬件部分包括控制部分以及数据分析的计算机系统,集成化微流控芯片和芯片扫描仪;软件系统包括微流控芯片控制和蛋白质芯片扫描分析软件和图像分析软件。
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