[发明专利]一种羽苔素E的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于制药技术领域，涉及一种羽苔素E的制备方法。

背景技术

羽苔素E（Plagiochin E），是从苔藓类地钱科地钱属植物地钱Marchantia polymorpha L.，以全草，分子式为C₂₈H₂₄O₄，分子量为424，结构式为

 

现代研究表明，羽苔素E具有抗真菌活性，对白色念珠菌有较好的抗真菌活性，其MIC=16μg/ml，对氟康唑耐药菌株表现相同的抗真菌活性，是一种潜在的抗菌制剂和逆转真菌耐药剂。

经文献检索，国内很少见羽苔素E的工业提取方法相关报道。中国专利“一种联苄类化合物羽苔素E及其提取分离方法与应用”（申请号为200410036045.0），公开了一种羽苔素E的提取分离方法，主要步骤为：乙醚或甲醇浸提、硅胶柱层析，该发明所述提取分离方法周期长，得率低，不利于工业化生产。因此，研究出一种制备羽苔素E的方法是非常必要的，对于扩大药源以及干地钱的综合利用具有很重要的意义。

发明内容

为了避免现有技术的不足之处，本发明提供了一种羽苔素E的制备方法，利用双水相萃取技术，不仅提高了羽苔素E的提取率，而且简化了工序，经济又适合工业化生产。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

（1）将干地钱粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取油脂类物质；

（2）脱脂物用乙醇溶液提取，得到提取液；

（3）提取液浓缩得浸膏，再按比例加入丙酮和磷酸氢二钾双水相系统混匀，在室温下静置2~5h，分为上、下两相；

（4）取出富含羽苔素E的丙酮相，加无机盐溶液混匀，再采用乙酸乙酯萃取，分离出富含羽苔素E的乙酸乙酯层进行减压浓缩，真空干燥，得到类白色粉末状羽苔素E。

所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取压力为20~35MPa，萃取温度为35~50℃，萃取0.5~2h。

所述步骤（2）中脱脂物置于闪式提取器中，加入原料质量5~8倍量体积的55~75%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取1~3次，每次5~15min，过滤得到提取液；

所述步骤（3）中闪式提取电压为140~160V，提取时间为60s~100s。

所述步骤（3）中丙酮加入量为浸膏体积量的1/2~4/5（V/V），磷酸氢二钾加入量为液体总体积量的15~30%（W/V）。

所述步骤（4）中无机盐溶液为3~5%氯化钠溶液。

本发明的有益效果是：采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效；采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；本发明利用双水相萃取的技术制备羽苔素E，该方法与以往传统的硅胶柱层析、大孔吸附树脂层析法相比，具有处理量大、工艺流程短，可进行连续操作、分离效率高等优点。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取1kg干地钱药材粉碎，置于萃取釜中，采用超临界脱脂，萃取温度为35℃，压力为25MPa，萃取时间为1h，脱脂物置于闪式提取器中，加入5L75%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取1次，提取15min，提取液减压浓缩得浸膏，向浸膏中加入1/2（V/V）丙酮、磷酸氢二钾，混匀，使所形成的双水相萃取体系中磷酸氢二钾质量占液体总体积量的15%，于50℃水浴1h，期间不断振摇，然后室温静置2h分相，取出富含羽苔素E的丙酮上相，加5%氯化钠溶液沉析，再采用2倍量乙酸乙酯萃取4次，分离出富含羽苔素E的乙酸乙酯层进行减压浓缩，浓缩浸膏于70℃下真空干燥，得到羽苔素E3.5g，含量80.57%，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2：