[发明专利]一种船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法在审
申请号: | 201410263995.0 | 申请日: | 2014-06-13 |
公开(公告)号: | CN104004705A | 公开(公告)日: | 2014-08-27 |
发明(设计)人: | 黄强 | 申请(专利权)人: | 山东恒诚检测科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07 |
代理公司: | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人: | 卢新 |
地址: | 261400 山东省烟台市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 船舶 压载舱 沉积物 活体 细胞 分离 方法 | ||
1.一种船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)采集船舶压载舱的沉积物,置于培养皿内;
(2)用过滤海水冲洗沉积物,并采用第一筛绢过滤,保存冲洗后的液体;
(3)将保存的液体采用第二筛绢过滤,保留所述第二筛绢上的残留物;
(4)用饱和蔗糖溶液冲洗所述第二筛绢上的残留物至离心管;
(5)将所述离心管离心;
(6)吸取所述离心管的所有上清液,采用第三筛绢过滤,保留所述第三筛绢上的残留物;
(7)用过滤海水漂洗所述第三筛绢上的残留物至培养皿中,实现活体细胞的分离,在显微镜下观察活体细胞。
2.根据权利要求1所述的船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:所述第一筛绢的孔径为200~250微米,所述第二筛绢和所述第三筛绢的孔径为30~50微米。
3.根据权利要求2所述的船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:步骤(4)中所述饱和蔗糖溶液的浓度为200-220克蔗糖/100毫升蒸馏水。
4.根据权利要求3所述的船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:步骤(5)中的所述离心采用台式离心机,转速为1000-1200rpm,离心时间为3-5分钟。
5.根据权利要求4所述的船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:所述步骤(2)和(7)中的过滤海水为0.15微米滤膜过滤后的海水。
6.根据权利要求1所述的船舶压载舱沉积物中活体细胞的分离方法,其特征在于:步骤(1)中称取5克所述沉积物置于培养皿内,步骤(2)和步骤(7)中的过滤海水的用量均为100毫升,步骤(4)中所述饱和蔗糖溶液用量为100毫升。
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