[发明专利]与大豆籽粒硬脂酸含量相关的紧密连锁标记及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种分子标记及其应用；特别涉及一种与大豆籽粒硬脂酸含量相关的紧密连锁标记及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

大豆油占世界植物油的30％，它主要包含有五种脂肪酸：软脂酸约占11％左右，硬脂酸约占4％左右，油酸约占24％左右，亚油酸约占54％左右，亚麻酸约占7％左右。虽然软脂酸和硬脂酸都是饱和脂肪酸，但硬脂酸并不同于软脂酸，有研究证明硬脂酸可以降低血液中总的胆固醇水平，益于人类健康，并且可以不用氢化直接生产人造奶油、润滑剂，油墨和生物石油等。因此增加大豆饱和脂肪酸含量以满足用油加工的需要将是一个重要的育种目标。

近年来，国内外对大豆硬脂酸的研究日渐增多，Spencer等(2003)用Dare x FAM94-41杂交的F2：3分离群体鉴定出连锁群B2上和硬脂酸高度相关的3个SSR标记Satt556，Satt474，Satt070；Xianzhi Wang等利用SD02-4-59和A02-381100杂交的重组自交系F5，运用CIM和IM方法定位到5个和硬脂酸高度相关的标记：BARC-041257-07953、BARC-029787-06340、Satt252、Sat_064、BARC-014699-01621；苗兴芬等在多种环境下检测到6个和硬脂酸有关的位点等，开发新的与大豆籽粒硬脂酸含量相关的紧密连锁标记对评价大豆籽粒中硬脂酸含量以及大豆育种具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种与大豆籽粒硬脂酸含量相关的紧密连锁标记及其应用。

本发明提供一对引物，该对引物由SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的DNA分子组成。

一种分子标记也属于本发明的保护范围，该分子标记是以植物组织的基因组DNA为模板，以所述的引物对为引物进行PCR扩增得到的DNA片段。

上述分子标记中，所述植物为大豆；

所述组织具体为叶片；

所述大豆具体为冀豆12号和/或黑豆。

所述黑豆为黑豆(ZDD03651)。

一种评价待测大豆的籽粒硬脂酸含量高低的方法也属于本发明的保护范围，，包括如下步骤：以待测大豆组织的基因组DNA为模板，以所述的引物对为引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；PCR扩增产物大小在140-155bp之间的大豆的籽粒硬脂酸含量高于PCR扩增产物含有大小分别在140-155bp之间的片段和在160-170bp之间的片段的大豆的籽粒硬脂酸含量，PCR扩增产物含有大小分别在140-155bp之间的片段和在160-170bp之间的片段的大豆的籽粒硬脂酸含量高于PCR扩增产物大小在160-170bp之间的大豆的籽粒硬脂酸含量。

上述方法中，所述PCR扩增产物大小在140-155bp之间的片段，与以冀豆12号组织的基因组DNA为模板，以所述的引物对为引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物的片段一致；

所述PCR扩增产物大小在160-170bp之间的片段，与以黑豆ZDD03651组织的基因组DNA为模板，以所述的引物对为引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物的片段一致。

上述任一所述的方法中，所述组织为叶片。

上述任一所述的方法中，所述待测大豆为冀豆12号和黑豆ZDD03651的杂交后代。

上述任一所述的方法中，所述冀豆12号为母本；

所述黑豆ZDD03651为父本；

所述杂交后代为F1代和/或F1代自交得到的F2代和/或F2代连续自交得到的后代。

上述引物对、上述任一所述的分子标记在评价大豆籽粒的硬脂酸含量高低中的应用也属于本发明的保护范围。

上述引物对、上述任一所述的分子标记在大豆选育中的应用也属于本发明的保护范围。

上述任一所述的应用中，所述大豆为冀豆12号和黑豆的杂交后代；

所述冀豆12号具体为母本；

所述黑豆具体为父本；

所述黑豆具体为黑豆(ZDD03651)；

所述杂交后代为F1代和/或F1代自交得到的F2代和/或F2代连续自交得到的后代。

本发明提供的连锁标记可以应用于评价大豆籽粒中硬脂酸含量及大豆选育。

附图说明

图1为群体Ⅰ、群体Ⅱ以及两亲本的籽粒硬脂酸含量的表型分布。

图2为satt556附近的5个标记间遗传连锁图。

具体实施方式