[发明专利]一种从废葡萄藤枝蔓中制备白藜芦醇和葡萄素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从废葡萄藤枝蔓中制备白藜芦醇和葡萄素的方法，尤其是涉及一种原材料前处理加工技术结合大孔吸附树脂分离技术从鲜葡萄藤废枝蔓中同时制备白藜芦醇和葡萄素的方法。

背景技术

白藜芦醇近年来被发现存在于葡萄植株的各个部位，在植物抗病性、人类心血管疾病和癌症预防等方面都表现出优异的特性。白藜芦醇的二聚物葡萄素在抗炎、抗菌、抗癌、抗氧化、预防心血管疾病方面，被证明具有与白藜芦醇相似的活性，甚至比白藜芦醇的活性还高。由于葡萄植株中（叶、果）白藜芦醇和葡萄素含量较低，仅百万分之五左右的含量，开发成本非常高，目前市场上白藜芦醇产品主要来源于药用植物虎杖。由于来源于虎杖的白藜芦醇产品中含有一定的毒副作用的共存组分，欧美市场更亲睐来源于葡萄的白藜芦醇产品，来源于葡萄的白藜芦醇产品价格也要高很多。 在葡萄栽培过程中，为了提高葡萄产量，每年在秋冬季需要修剪掉大量的葡萄藤枝蔓，剪下来的葡萄藤枝蔓一般都是采取就地烧掉的办法进行处理，造成了生态环境的污染和资源的严重浪费。经研究发现采取适当的前处理方法对剪枝后得到的葡萄藤废枝蔓进行处理，能显著提高其中白藜芦醇和葡萄素的含量，达到工业化生产的需要。超声波辅助萃取具有提取效率高、速度快、价格低等优点，大孔吸附树脂由于具有吸附速度快、选择性好、再生处理方便、使用周期长等特点，在中草药活性成分的提取分离中应用得到越来越多的应用。

    本方法对废葡萄藤枝蔓进行前处理加工，结合超声波辅助提取和大孔吸附树脂分离，从剪枝得到的废葡萄枝蔓中获得白藜芦醇和葡萄素产品。本方法为白藜芦醇和葡萄素产品提供了一种新的材料来源，同时建立了一条葡萄来源的白藜芦醇和葡萄素的快速、高效、经济的制备方法。

发明内容

本发明提供了一种从废葡萄藤枝蔓中制备白藜芦醇和葡萄素的方法。该方法采取前处理加工方法对新剪枝得到的葡萄藤枝蔓进行预处理，显著提高葡萄藤枝蔓中活性成分白藜芦醇和葡萄素的含量，采取超声波辅助萃取技术对葡萄藤枝蔓进行提取，获得白藜芦醇和葡萄素粗提取物，再选择大孔吸附树脂进行吸附，用不同浓度的乙醇进行洗脱，分别获得白藜芦醇和葡萄素产品。该方法采用前处理技术预处理葡萄藤枝蔓，可显著提高白藜芦醇和葡萄素含量，白藜芦醇和葡萄素提取分离方法操作简单，无污染。该方法获得的白藜芦醇和葡萄素产品的率高，含量高。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的。

其包括如下步骤：（1）葡萄藤枝蔓前处理：将秋天新剪枝下的葡萄藤废枝放置于阴凉干燥、阴暗避光的室内保存60-90天，期间每隔10天取样测定葡萄藤枝蔓中白藜芦醇和葡萄素含量。待白藜芦醇含量超过1.0%时，将葡萄藤枝蔓进行切碎或粉碎成粗粉待用。（2）超声波辅助提取：称取一定量葡萄藤枝蔓粗粉，加入2-5倍量的蒸馏水，润湿后，超声30分钟。然后加入5-10倍食用酒精，于多功能提取罐中回流提取1-2h，滤布过滤得提取液，葡萄藤枝蔓残渣重复提取1次，合并提取液，高速离心，取上清液备用。（3）浓缩回收溶剂：真空减压浓缩回收乙醇，将浸膏真空干燥得葡萄藤枝蔓粗提取物。（4）大孔吸附树脂分离：选择弱极性或非极性大孔吸附树脂如D101、AB-8等，将树脂进行预处理，充分溶胀、去除其中所含未聚合的有机溶剂。将大孔吸附树脂装填在玻璃柱或不锈钢柱子中，将葡萄藤枝蔓粗提取物加蒸馏水加热溶解，湿法上样，同时薄层色谱检测流出液白藜芦醇和葡萄素含量，直至吸附饱和。对吸附饱和的大孔吸附树脂柱用1倍床体积(BV)的蒸馏水以2倍BV/h速度洗脱未被吸附的提取液，然后以3BV的50%的乙醇以2BV/h速度洗脱，收集洗脱液，然后再以3BV的70%的乙醇以2BV/h速度洗脱，收集洗脱液。（5）将50%乙醇洗脱得到的洗脱液减压浓缩，回收乙醇，将得到的浸膏进行真空干燥，得到白藜芦醇产品，将70%乙醇洗脱得到的洗脱液减压浓缩，回收乙醇，将得到的浸膏进行真空干燥，得到葡萄素产品。

经过本发明的方法制备得到的白藜芦醇和葡萄素，白藜芦醇得率为1.1以上，含量可达25%以上，葡萄素得率为1.0，含量可达20%以上，两种产品回收率均达85%以上。