[发明专利]一种阿维菌素B2a的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种阿维菌素B_2a的制备方法，特别是一种阿维菌素B_2a的提取方法。

背景技术

阿维菌素(Avermectins)是由阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)产生的一组结构相似的十六元大环内酯齐敦果糖双糖衍生物，1975年由日本北里研究所从日本静冈县的一个土壤样品中分离得到。阿维菌素具有广谱、高效抗各种线虫和人类寄生虫的活性。阿维菌素杀虫和抗寄生虫机制较为独特，与其它抗寄生虫药物无交叉耐药性、毒性低、无残留等优点，因此阿维菌素是至今发现最有效的杀虫剂（包括杀螨虫）之一。阿维菌素有八种组分（A组分4种和B组分4种）：即A_la，A_lb，A_2a，A_2b，B_la，B_lb，B_2a，B_2b，通常只有B_l具有药效，并以B_la活性最高。作为比较成熟的生物农药产品，在过去的几十年内，阿维菌素主要集中研究B_1a,然而目前研究表明，在B组分中，除B_1a外，其他三种组分如B_2a也有较大应用价值。

由于B_2a也具有类似于B_1a的活性官能团结构，因此类似于B_1a系列的下游产品存在了一定的理论和现实依据， B_2a即是其中重要的组分。然而，制备出纯度较高的B_2a精品还有赖于精提工艺的开发。通常目前的阿维菌素B_2a是阿维菌素发酵菌渣中除阿维菌素B_1a外的另一主要活性组分，在完成对B_1a的提取精制后，主要存在于结晶母液中。据有关报道，阿维菌素B_2a其药效比现在市场上的阿维菌素B_1a药效更佳，而且毒性更小，但是由于没有一种有效的提取分离阿维菌素B_2a的工艺，所以目前市场上未见其精品。导致当前阿维菌素B_2a通常都是用来配制阿维菌素B_1a油膏。随着市场对阿维菌素B_1a油膏的限制使用，对于阿维菌素B_1a结晶母液的后处理问题越来越重要，而对于单组分阿维菌素发酵菌渣来说，其结晶母液中主要成分是阿维菌素B_2a。因此，从阿维菌素B_2a的药效来看，应该比阿维菌素B_1a具有更大的市场潜力，而且还具备进一步开发阿维菌素B_2a下游产品（如伊维菌素）的潜力。因此，我们在开发阿维菌素B组分菌种的过程中，需要解决目前生产阿维菌素B_2a过程如何提取B_2a精品的问题，这样不仅解决了市场对阿维菌素B_1a油膏的限制使用所带来的隐患，而且还进一步拓展了阿维菌素系列产品的生存空间，意义重大。

关于阿维菌素B_2a提取的报道，主要有两种方法：一种是在正己烷和乙醇复合溶剂中结晶；一种是采用硅胶层析分离。申请人通过小试摸索结晶方法，已经从阿维菌素B_1a结晶母液中获得了含量80%以上的阿维菌素B_2a，而且产品具有良好的外观。目前，对阿维菌素B_2a的研究提取工艺主要有：超临界CO₂萃取工艺、超声波提取工艺以及常规的乙醇回流提取工艺，通过结晶纯度可达到80.21％。如CN专利201210548729公开了一种阿维菌素B_2a的提取制备方法，其主要是将阿维菌素混合组分的发酵液制成干菌丝体，通过一般浸提、浓缩后进行甲苯萃取获得母液，在母液中重新进行甲苯萃取和结晶，获得阿维菌素B_2a粗品，该发明采用发酵液制成干菌体，劳动强度大，在工业阶段难以实现，而且通过单一溶剂的浸提、浓缩难以达到实际效果。而US5077398虽采用正己烷和乙醇复合溶剂，但在实际试验过程中正己烷价格较高，使用效果不佳，制备阿维菌素B_2a也很难实现。现有技术均未对发酵液的色素进行脱色，会导致发酵液的色素积累影响阿维菌素的结晶过程。

发明内容