[发明专利]一种用于他汀类药物的手性中间体的制备方法

权利要求书

1.一种如式(Ι)所示的用于他汀类药物的手性中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)以氯乙酸(1)和苄醇(2)为起始原料，通过醚化反应生成苄氧乙酸(3)；

2)苄氧乙酸(3)与吗啡啉进行缩合反应生成2-苄氧基吗啡啉乙酰胺(4)；

3)2-苄氧基吗啡啉乙酰胺(4)与式(5)所示的乙酰乙酸酯进行取代反应生成式(6)所示的二酮中间体；

4)式(6)所示的二酮中间体通过不对称还原反应生成式(7)所示的手性二醇中间体；

5)式(7)所示的手性二醇中间体与2,2-二甲氧基丙烷反应生成式(8)所示的(4R-cis)-6-(苄氧基)-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-己酸酯；

6)式(8)所示的(4R-cis)-6-(苄氧基)-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-己酸酯脱除苄基得到式(9)所示的(4R-cis)-6-羟甲基-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-己酸酯；

7)式(9)所示的(4R-cis)-6-羟甲基-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-己酸酯通过氧化反应得到式(Ι)所示的手性中间体；

反应式如下：

其中，R表示C4～C10的烷基。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，R表示叔丁基、叔戊基、环戊基或环己基。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，所述式(5)所示的乙酰乙酸酯由双烯酮与式(10)所示的醇通过开环加成反应制得；

反应式如下：

4.根据权利要求1或2的所述制备方法，其中，所述步骤4)中的不对称还原反应过程如下：将式(6)所示的二酮中间体均匀分散至溶剂中，加入还原酶、甲酸或甲酸盐、NAD⁺，调节pH值为6.2～6.4，然后将体系升温至27～33℃，保温17～24h即得。

5.根据权利要求4的所述制备方法，其中，所述还原酶的用量与所述式(6)所示二酮中间体的用量质量比为0.00005～0.004:1。

6.根据权利要求5的所述制备方法，其中，所述还原酶为含有选自如下所示的氨基酸序列之一的双羰基还原酶突变体：

a)SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：6；

b)与a)中所示序列具有至少70％同一性且具有改进的双羰基还原酶活性的序列；或

c)a)中的序列经删除、添加和/或替换一个或多个氨基酸残基而得到且具有改进的双羰基还原酶活性的序列，

其中b)中所示的序列不是SEQ ID NO：7所示的序列。

7.根据权利要求6的所述制备方法，其中，所述双羰基还原酶突变体含有如SEQ ID NO：1、2、3、4、5或6所示的氨基酸序列。

8.根据权利要求4的所述制备方法，其中，所述溶剂选自纯化水、聚乙二醇、异丙醇、乙腈、四氢呋喃、乙醇、正庚烷、甲苯、丙酮、二甲基甲酰胺、甲醇中的一种或多种。

9.根据权利要求4的所述制备方法，其中，所述甲酸盐选自甲酸铵、甲酸钠或甲酸钾，所述甲酸或甲酸盐的用量与所述式(6)所示二酮中间体的用量摩尔比为2～10:1。

10.根据权利要求4的所述制备方法，其中，所述NAD⁺的用量与所述式(6)所示二酮中间体的用量质量比为0.001～0.1:1。