[发明专利]甘薯叶绿原酸与纳米氧化锌抑菌组合物

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，尤其涉及一种中药抑菌物。

背景技术

甘薯又名番薯、红薯等，是世界上最重要的粮食、饲料和工业原料，广泛种植于100多个国家。甘薯是药食同源食品，具有补中、和血、肥五脏、补虚气、益气力、健脾胃、强肾阴等多种保健功能。同时还具有消除活性氧、抑制皮肤老化、抑制胆固醇、预防肺气肿、防癌和益于心血管健康等作用。甘薯叶中除含有以上营养成分外，还富含活性多糖和绿原酸等化合物。现代药理学研究表明绿原酸具有抗菌、抗病毒的作用。除此之外，绿原酸还有对自由基的清除及抗脂质过氧化、保肝利胆、抗诱变及解痉等作用。绿原酸因其具有较高的药用和保健功能，广泛引起人们的关注。中药制剂浓缩液制成口服液或抑菌组合物等一次用剂量大，且长期使用影响人体健康。

发明内容

针对绿原酸抑菌组合物一次用量大和长期使用影响人体健康问题，本发明人经过大量实验，发现纳米氧化锌能有效增强绿原酸提取液抑菌性能，减少绿原酸抑菌剂的用量，且采用两种抑菌组合物，更加的安全。本发明的目的在于提供一种绿原酸纳米氧化锌抑菌组合物抑菌剂，减少绿原酸抑菌剂一次的用剂量和降低药品对人体的毒性。

本发明提供如下技术方案：

甘薯叶绿原酸与纳米氧化锌抑菌组合物，含有绿原酸提取液、纳米氧化锌。

所述的绿原酸提取液的制备包括如下步骤：每称取甘薯叶粉末6g，按料液比1g:12mL加入pH值为4的60%的乙醇溶液；水浴恒温80℃回流提取2.5h后趁热抽滤，滤渣重复1次后回流提取1h，抽滤、合并滤液。按2%左右的比例分2-3次加入活性炭进行脱色，每次脱色30min后抽滤，滤液于5000r/min条件下离心30min，收集上清液备用；

所述纳米氧化锌为10mg/mL的纳米氧化锌胶体溶液。

抑制大肠杆菌O157:H7时，所述绿原酸提取液中绿原酸浓度47.8μg/mL，纳米氧化锌的浓度为10 mg/mL，体积比70:3。

抑制金黄色葡萄球菌时，所述绿原酸提取液中绿原酸浓度47.8μg/mL，纳米氧化锌的浓度为10mg/mL，体积比25:1。

本发明还涉及，所述抑菌组合物在制备抑制大肠杆菌O157:H7药物中的应用。

抑菌组合物在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。

本发明的有益效果是：本发明纳米锌的应用能有效增强绿原酸抑菌性能，增加纳米氧化锌的溶解度，降低绿原酸抑菌剂的用量，更令人意想不到的是两种药物的合用对抑制大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌菌起到协同作用，同时本抑菌组合物采用两种低剂量的抑菌物质，相对于使用高剂量的绿原酸或者纳米氧化锌，更加的安全，可以作为安全可靠地外用涂覆剂等。

具体实施方式

实施例1

1，  绿原酸提取液的制备包括如下步骤：准确称取甘薯叶粉末6g，按料液比1g:12mL加入pH值为4的60%的乙醇溶液；水浴恒温80℃回流提取2.5h后趁热抽滤，滤渣重复1次后回流提取1h，抽滤、合并滤液。按2%左右的比例分2-3次加入活性炭进行脱色，每次脱色30min后抽滤，滤液于5000r/min条件下离心30min，收集上清液备用。所得的提取液经紫外可见光光度计对绿原酸进行标准定量。提取液中绿原酸的含量为47.8μg /mL。

2，  纳米氧化锌溶液依照下列方法制备：取上海阿拉丁有限公司生产的纳米氧化锌0.01g溶于1mL的蒸馏水中，震荡混匀得到10mg/mL的纳米氧化锌胶体溶液，粒径为200nm.

3，  绿原酸提取液与纳米氧化锌的协同抑菌作用。

a 细菌的培养

挑取LB琼脂培养基上的大肠杆菌O157的单菌落于10mL LB肉汤培养基中，置于37℃培养箱中培养12 h，再按1％的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37℃培养5h后，取1 mL上述菌液用1xPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为10⁶CFU/mL。

b 绿原酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的协同作用

分别取1 mL上述已稀释好的菌液于1.5 mL灭菌的离心管中，向1号离心管中分别加70μL绿原酸提取液（绿原酸素的含量为47.8μg/mL，下同），向2号离心管中加入3μL浓度10 mg/mL的纳米氧化锌，向3号离心管中加入35μL绿原酸提取液和1.5μL浓度为10 mg/mL的纳米氧化锌，不加入任何上述抑菌剂。为保证每管液体最终体积相等，差量用1xPBS水补齐。置于37℃培养2 h。每组实验平行三次。