[发明专利]一种流感病毒通用疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种流感病毒通用基因疫苗，其特征在于：由克隆有流感H1N1病毒株的HA2基因的pCAGGS真核表达载体构成。 

2.一种流感病毒通用基因疫苗的制备方法，包括如下步骤： 

1)流感H1N1病毒株的HA2基因的获取； 

2)流感病毒重组质粒的制备； 

3)将重组质粒进行浓度调整，分装至不同EP管中，获得疫苗成品。 

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的流感H1N1病毒株的HA2基因的获取步骤包括：将A/Puerto Rico/8/1934(H1N1)病毒株倍比稀释，并将稀释产物接种9-11日龄的SPF鸡胚，进行病毒的大量扩增，48h后收取鸡胚尿囊液，利用引物进行HA2基因的大量扩增，并对其进行产物回收。 

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，引物序列为： 

正向引物：5’-ATCGATGGTCTATTTGGAGCCAT-3’ 

反向引物：5’-AGATCTGATGCATATTCTGCACT-3’。 

5.根据权利要求2-4所述的制备方法，其特征在于，流感病毒重组质粒的制备步骤包括：对获取的HA2基因及pCAGGS真核表达载体进行ClaⅠ/BglⅡ双酶切，对产物进行回收及连接转化，并作大量扩增，从克隆产物中提取重组质粒。 

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的转化及大量扩增是将目的基因与表达载体连接，并将连接产物转入DH5α大肠杆菌中，利用常见的含有氨苄青霉素的LB溶液过夜培养。 

7.流感H1N1病毒株的HA2基因和pCAGGS真核表达载体在制备流感病毒通用基因疫苗中的用途。