[发明专利]一种枯草芽孢杆菌发酵培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种培养基，适用于枯草芽孢杆菌发酵产生抑菌代谢产物，具体地说，涉及一种枯草芽孢杆菌发酵培养基，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

枯草芽孢杆菌的发酵代谢产物可通过多途径杀灭致病菌，不会产生耐药性，使用的同时能够增强机体免疫机能，而且不会在畜禽体内蓄积，安全无残留，但是在规模化生产时受到一些条件的制约：由于其发酵培养基的各组成成分如酵母提取物和牛肉膏等单价较高，用量也较大，导致生产成本过高，无法应用于大规模生产；培养基中某些成分溶解性差，降低了代谢效率和产物效价，同时导致后期提取工艺复杂；培养基中组分较多，将直接导致发酵液成分复杂，增加了提取的难度，且提取物的效价难以保证，种种问题限制了枯草芽孢杆菌发酵产物在医药、农业、工业上的应用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种枯草芽孢杆菌发酵培养基，所述发酵培养基可达到降低成本、简化后期提取工艺、提高代谢产物抑菌效价的目的。

为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：一种枯草芽孢杆菌发酵培养基，其特征在于：所述发酵培养基的有效成分包括碳源、氮源和无机盐。

一种优化方案，所述碳源为葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖或甘露醇中的一种。

另一种优化方案，所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、豆粕粉、玉米浆或硝酸钾中的一种。

再一种优化方案，所述无机盐为磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化钾、氯化钠、硫酸镁、硫酸锰、无水氯化钙或硫酸亚铁中的一种或多种。

进一步的优化方案，所述发酵培养基的有效成分包括葡萄糖、蛋白胨、磷酸氢二钾、氯化钠、无水氯化钙和硫酸锰。

再进一步的优化方案，所述发酵培养基的组分及含量为：蛋白胨1.2%～2.5%、葡萄糖1.0%～2.0%、磷酸氢二钾0.1%～0.3%、氯化钠0.08%～0.2%、无水氯化钙0.01%～0.1%、硫酸锰0.001%～0.005%，余量为纯化水。

更进一步的优化方案，所述发酵培养基的组分及含量为：葡萄糖1.6%、蛋白胨1.45%、磷酸氢二钾0.2%、氯化钠0.08%、无水氯化钙0.05%、硫酸锰0.002%，余量为纯化水。

本发明还提供一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

1）按含量比取葡萄糖，将葡萄糖溶解于纯化水中得到葡萄糖溶液，在无菌条件下过滤，滤液保持无菌，备用；

2）按含量比取蛋白胨、磷酸氢二钾、氯化钠、无水氯化钙和硫酸锰，混合均匀，加纯化水至完全溶解；

3）将步骤2）中的混合溶液高压蒸汽灭菌；

4）在无菌条件下将步骤1）中的滤液加入到步骤3）得到的混合溶液中，混合均匀。

一种优化方案，所述步骤2）中调整混合溶液的pH值至7.2～7.4。

另一种优化方案，所述步骤3）中将步骤2）中的混合溶液置于115℃高压蒸汽灭菌30min。

本发明采用以上技术方案后，与现有技术相比，具有以下优点：所述发酵培养基的有效成分仅含有蛋白胨、葡萄糖和4种无机盐，蛋白胨的含量为1.2%～2.5%、葡萄糖的含量为1.0%～2.0%，这两种主要成分的含量大大降低，而且无机盐的种类和含量也都减少，因其成分简单且用量较少，大大降低了成本，粗略估计，每吨发酵液成本可降低3000～7500元，各有效成分均可溶且相辅相成，发酵液粘稠度下降，有利于后期提取工艺的简化；所得发酵液成分简单，便于提取菌体抑菌代谢产物，进而大幅提高提取物效价，所述发酵培养基培养菌体所得的发酵液效价与基础培养基培养所得发酵液相比，提高了47.89%，本发明所述培养基具有降低成本、简化后期提取工艺、提高代谢产物抑菌效价的优点，为大规模生产提供了基础。

下面结合附图和实施例对本发明进行详细说明。

附图说明

附图1是本发明实施例1中不同碳源的发酵培养基的发酵产物效价；

附图2是本发明实施例2中不同葡萄糖含量的发酵培养基的发酵产物效价；

附图3是本发明实施例3中不同氮源的发酵培养基的发酵产物效价；

附图4是本发明实施例4中不同蛋白胨含量的发酵培养基的发酵产物效价；

附图5是本发明实施例5中不同无机盐的发酵培养基的发酵产物效价。

具体实施方式