[发明专利]通过脂肪酶催化制备生物柴油的方法

权利要求书

1.制备生物柴油的方法，包括以下步骤：

a)将催化酯化反应的脂肪酶和催化转酯反应的脂肪酶的组合添加到多元醇中，调节pH至3-7，进行高速剪切处理，从而得到预处理的脂肪酶液；

b)将步骤a)中得到的脂肪酶液与油脂原料和低级醇接触，进行反应；

其中

所述多元醇选自甘油、1,3丙二醇、1,4丁二醇和乙二醇或者其任意组合；

所述油脂原料选自棕榈油脂肪酸馏出物、大豆油脱臭馏出物、酸化油、地沟油和煎炸废油或者其任意组合。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述催化酯化反应的脂肪酶和催化转酯反应的脂肪酶的组合和多元醇的重量比为1:4-1:20。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述pH为3.5-6.6。

4.如权利要求1所述的方法，其中步骤b)还包括将所述油脂原料预热。

5.如权利要求4所述的方法，其中将所述油脂原料预热至55℃-75℃。

6.如权利要求1所述的方法，其还包括步骤c)：步骤b)所述的反应结束后，使水酯两相分离，移除上层酯相后，向下层水相加入新的油脂原料进行反应。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述多元醇为甘油。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述催化酯化反应的脂肪酶和所述催化转酯反应的脂肪酶的重量比为1:10-10:1。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述脂肪酶来自脂肪酶产生菌。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述脂肪酶产生菌选自以下微生物：黑曲霉菌(Aspergillus niger)、南极假丝酵母(Candida antarctic)、褶皱假丝酵母(Candidarugosa)、疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)、米黑根毛霉(Rhizomucormiehei)和假单胞菌属(Pseudononas sp.)。

11.如权利要求1-10任一项所述的方法，其中所述低级醇选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇和戊醇或者其任意组合。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述低级醇为甲醇或乙醇。

13.提高脂肪酶组合催化活性的方法，其包括在催化反应前将催化酯化反应的脂肪酶和催化转酯反应的脂肪酶的组合添加到多元醇中，并调节pH至3-7，以及进行高速剪切处理；

其中所述多元醇选自甘油、1,3丙二醇、1,4丁二醇和乙二醇或者其任意组合。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述pH为3.5-6.6。

15.脂肪酶液，其特征在于包含催化酯化反应的脂肪酶和催化转酯反应的脂肪酶的组合以及多元醇，且pH值为3-7；

其中所述多元醇选自甘油、1,3丙二醇、1,4丁二醇和乙二醇或者其任意组合。

16.如权利要求15所述的脂肪酶液，其中所述催化酯化反应的脂肪酶和催化转酯反应的脂肪酶的组合与多元醇的重量比选自1:4-1:20。