[发明专利]一种复合多肽的联合提取制备方法有效
申请号: | 201410142330.4 | 申请日: | 2014-04-09 |
公开(公告)号: | CN103882085B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 杨永鹏;郝林琳;董萍;丁克祥;张鑫;左夏林;虞伟民;刘莉;梁虹;丁振华 | 申请(专利权)人: | 杨永鹏;董萍;丁克祥 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/12;C07K1/34 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116011 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 复合 多肽 联合 提取 制备 方法 | ||
1.一种复合多肽联合提取制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取新鲜的待提取物,匀浆后加入10~30倍重量的白醋,并将pH值调至3.5~4.5,再在冰浴条件下进行超声破碎处理0~40min;将烧杯置于4℃冰箱中进行磁力搅拌4~24h;然后,12000r/min,离心20min,沉淀称重,同时收集上清液进行超滤,1μm膜粗滤,透过液进行10万分子量膜和1万分子量的膜超滤,未透过滤液用于下个步骤提取,最后进行纳滤,纳滤液进行冷冻干燥,即可得到复合天然多肽;
(2)取步骤(1)所得的沉淀和未透过液,加入2倍体积的蒸馏水和1000U/g、1500U/g、2000U/g的中性蛋白酶,搅拌均匀,加入碱液将pH调节至5.5~7.5,在水浴温度45~65℃下提取1~3h,结束后用白醋调节中性酶pH至4.0,终止酶解反应,12000r/min,离心20min,收集上清液进行超滤,1μm膜粗滤,透过液进行10万分子量的膜和1万分子量的膜超滤,滤液再通过300纳米的纳滤膜进行纳滤,纳滤截留获得的浓缩液冷冻干燥得到复合酶解多肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)或(2)所述的透过液进行超滤,它包括两次超滤,第一次经过10万膜超滤,第二次经过1万膜超滤。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中采用蒸馏水调节白醋的pH值。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述调节pH值的碱液为1摩尔的氢氧化钠。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)或(2)所述的冷冻干燥条件为-45℃预冻1h,-80℃,4.5Pa冷冻干燥20h。
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