[发明专利]凝结芽孢杆菌益生菌制剂的制备

权利要求书

1.一种凝结芽孢杆菌益生菌制剂，所述益生菌制剂由固态发酵制备，包括菌种培养及其固态发酵培养，其特征在于，固态发酵培养方法为：首先接种凝结芽孢杆菌HM-09，接种量为2.0-8.0%，控制发酵温度32-42℃,湿度70-85%，至pH降至6.5-6.8，接种动物双歧杆菌乳亚种V9，接种量为3.0-5.0%，控制发酵温度32-37℃,湿度70-80%，混合培养24-48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述凝结芽孢杆菌HM-09（Bacilluscoagulans），保藏号：CGMCCNo.6729；

所述动物双歧杆菌乳亚种V9（Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis），保藏号：CGMCCNo.5470。

2.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌益生菌制剂，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌HM-09种子培养基组成如下：蛋白胨10.0-15.0g，酵母膏10.0-15.0g，葡萄糖5.0-10.0g，MgSO₄·7H₂O0.5-1.0g，K₂HPO₄1.0-2.0g，MnSO₄50-100mg，加入1L蒸馏水，调节pH至7.0-7.2；动物双歧杆菌乳亚种V9种子培养基组成为：蛋白胨20-50g，葡萄糖20-50g，加水至1L，pH7.0-7.2；固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:8-10:0.5-1，水份含量控制在40-75%，pH7.0-7.2。

3.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌益生菌制剂，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌HM-09种子培养条件，放置于摇床上，转速为160-180r/min，温度为35-45℃，培养20-24h；所述动物双歧杆菌乳亚种V9种子培养条件为30-38℃，静置培养20-24h。

4.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌益生菌制剂，其制备方法包括菌种培养及其固态发酵培养；其特征在于，

首先接种凝结芽孢杆菌HM-09，接种量为5.0%，培养温度37℃,湿度80%，至pH降至6.5，接种动物双歧杆菌乳亚种V9，接种量为3.0%，控制发酵温度37℃,湿度80%，共计混合培养48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述凝结芽孢杆菌HM-09种子培养条件，放置于摇床上，转速为170r/min，温度为37℃，培养24h；

所述动物双歧杆菌乳亚种V9种子培养条件为37℃，静置培养24h；

所述凝结芽孢杆菌HM-09种子培养基组成如下：蛋白胨10.0g，酵母膏10.0g，葡萄糖6.0g，MgSO₄·7H₂O1.0g，K₂HPO₄2.0g，MnSO₄50mg，加入1L蒸馏水，调节pH至7.0-7.2；动物双歧杆菌乳亚种V9种子培养基组成为：蛋白胨20g，葡萄糖20g，加水至1L，pH7.0-7.2；

所述固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:10:0.5，水份含量控制在60%，115℃高压灭菌25min。

5.根据权利要求4所述凝结芽孢杆菌益生菌制剂，其特征在于，发酵制品中凝结芽孢杆菌HM-09活菌数为2.90×10⁹CFU/g，动物双歧杆菌乳亚种V9活菌数为5.22×10⁸CFU/g，游离氨基态氮的含量为318.2umol/g。

6.权利要求1-5任一所述凝结芽孢杆菌益生菌制剂的制备方法，步骤包括菌种培养及其固态发酵培养，其特征在于，固态发酵培养方法为：首先接种凝结芽孢杆菌HM-09，接种量为2.0-8.0%，控制发酵温度32-42℃,湿度70-85%，至pH降至6.5-6.8，接种动物双歧杆菌乳亚种V9，接种量为3.0-5.0%，控制发酵温度32-37℃,湿度70-80%，混合培养24-48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述凝结芽孢杆菌HM-09（Bacilluscoagulans），保藏号：CGMCCNo.6729；

所述动物双歧杆菌乳亚种V9（Bifidobacteriumanimalissubsp.lactis），保藏号：CGMCCNo.5470。